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研究背景和目的:胶质瘤(Glioma)是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤。由于胶质瘤呈弥漫性浸润生长,并影响和侵袭正常脑组织,手术常常难以彻底切除,且手术后放化疗效果欠佳。手术、放疗和辅以替莫唑胺(TMZ)化疗是目前新诊断的神经胶质瘤患者首选的治疗方案,但是效果并不理想。酸性核磷蛋白32(ANP32)家族成员与肿瘤进展、损伤保护以及药物耐受紧密相关。其中磷蛋白32A(ANP32A)是发现最早且研究最多的蛋白,与肝癌、前列腺癌、乳腺癌以及结直肠癌等多种恶性肿瘤的进展密切相关。我们前期研究表明,ANP32A在哺乳动物脑组织中高表达,并参与神经发育过程。进一步研究表明,ANP32A在胶质瘤组织中高表达,但其在胶质瘤发生中的作用及机制目前尚不明确。本研究旨在通过体内体外实验和临床病例分析,揭示ANP32A在胶质瘤进展中的作用及相关机制。实验方法:构建携带人ANP32A序列或其干扰序列的慢病毒载体,制备慢病毒并转染人胶质瘤细胞系U251细胞,嘌呤霉素筛选ANP32A高/低表达U251细胞株;与对照组细胞相比,观察ANP32A高/低表达对U251细胞表型的影响,包括CCK-8实验和流式细胞术检测U251细胞增殖和凋亡;Transwell以及划痕实验检测U251细胞迁移和侵袭能力;免疫细胞化学染色以及Western blot观察细胞蛋白表达水平。通过斑马鱼移植瘤模型观察ANP32A对U251细胞成瘤和迁移的影响。胶质瘤临床病例和肿瘤组织免疫组化分析ANP32A表达水平,Kaplan Meier等统计学方法分析ANP32A与患者预后相关性。结果:1.成功构建ANP32A高/低表达的人胶质瘤U251细胞株;ANP32A高/低表达能够促进/抑制U251细胞的增殖、迁移和侵袭,并且抑制/促进U251细胞凋亡。2.ANP32A能够诱导U251细胞中等表达升高,而对PP2A的作用相反;同时ANP32A可抑制低氧、化学药物等对U251细胞的损伤作用。3.ANP32A高/低表达能够激活/抑制U251细胞中Akt磷酸化,人重组蛋白ANP32A细胞外刺激可激活U251细胞的Akt信号通路,且具有时间依赖性。4.在斑马鱼移植瘤模型中,ANP32A 高/低表达能够促进/抑制肿瘤生长和迁移。5.ANP32A表达水平与胶质瘤病理分期呈正相关,高级别胶质瘤病理组织中ANP32A表达水平较高。ANP32A高表达是患者预后不良的独立预测指标,ANP32A高表达胶质瘤患者的总体生存率显著低于ANP32A低表达的胶质瘤患者的总体生存率。结论:本研究结果显示,ANP32A促进胶质瘤进展,其机制可能与ANP32A调控RNA结合蛋白HuR等蛋白因子表达有关,并激活Akt信号通路。ANP32A高表达可能是患者预后不良的独立预测指标。本研究提示ANP32A可作为胶质瘤标志物用于分子诊断、预后评价,为胶质瘤诊断和治疗提供新的思路和治疗靶点。