血管抑素基因(K1-3)腺病毒表达载体的构建与鉴定

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本研究构建了携带血管抑素(angiostatin,AG)基因(K1-3)重组复制缺陷型腺病毒表达载体。研究将人血管抑素K(1-3)cDNA插入穿梭载体pShuttle产生重组质粒pShuttle-AG(Kl-3),经双酶切后目的基因与骨架载体pAdeno-X连接重组产生pAdeno-X-AG(K1-3),转染HEK-293细胞制备重组腺病毒。 结果对pShuttle-AG(K1-3)进行酶切鉴定及测序证实插入片断为AG(K1-3)基因。PCR扩增pAdeno-X-AG(K1-3),得到318bp特异性片断。线性pAdeno-X-AG(K1-3)转染293细胞,成功包装出重组腺病毒。研究结论成功构建了携带人angiostatin(K1-3)重组腺病毒载体,可在体外表达具有生物学活性的人angiostatin(K1-3),为进一步研究奠定了基础。
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