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目的:卒中后抑郁(PSD)是脑卒中的主要并发症,严重影响功能恢复和生活质量,炎症假说在PSD的病理生理机制中发挥着重要作用。Fn14是唯一已知的TNF家族成员TWEAK的信号受体。脑室内(intracerebroventricular,ICV)注射FC-TWEAK小鼠表现出明显的抑郁样行为和认知功能障碍,并有促进炎症、细胞调亡等作用,但在PSD中作用机制尚不清楚。TWEAK/Fn14结合后,是否通过JNK通路介导神经炎症、细胞凋亡引起PSD在很大程度上仍是未知的。本研究采用大脑中动脉栓塞(MCAO)联合ICV注射FC-TWEAK建立PSD大鼠模型,探讨JNK信号通路的调控在ICV注射FC-TWEAK诱导的PSD中涉及的促炎、促凋亡机制,为PSD的治疗提供新的靶点。方法:60只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为5组:正常对照组(Control,N=12)、卒中组(MCAO,N=12)、卒中+二甲基亚砜组(MCAO+DMSO,N=12)、PSD组(MCAO+TWEAK,N=12)、PSD+JNK抑制剂组(MCAO+TWEAK+SP600125,N=12);正常对照组不给予任何处理,卒中采用的是MCAO;于卒中大鼠ICV注射FC-TWEAK,经行为学测试,确定PSD组。卒中+DMSO组ICV注射DMSO作为溶剂对照,PSD+JNK抑制剂为PSD大鼠ICV注射SP600125。通过观察大鼠的旷场实验(OFT)、强迫游泳(FST)、蔗糖偏好(SPT)、体重测量实验进行抑郁样行为测试。采用蛋白印迹(Western blot)技术检测大鼠海马组织相关蛋白c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(P-JNK)、转录调节因子(c-jun)和半胱天冬酶3(caspase3)蛋白量的表达,采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测海马区炎症因子IL-1β、IL-6和TNFαmRNA水平的表达。结果:1.大鼠行为学测试:1.1旷场实验结果:在大鼠MCAO术后31天时,PSD组与卒中+DMSO组比较不动时间明显增加(P<0.05);PSD+JNK抑制剂组与PSD组相比较,不动时间明显减少(P<0.05),差异具有统计学意义;1.2强迫游泳实验:在大鼠MCAO术后30天时,PSD组与卒中+DMSO组比较总不动率明显增加(P<0.05);PSD+JNK抑制剂组与PSD组相比较,总不动率明显减少(P<0.05),差异具有统计学意义;1.3蔗糖偏好实验:在大鼠MCAO术后30天时,PSD组与卒中+DMSO组比较蔗糖偏好指数明显减少(P<0.05);PSD+JNK抑制剂组与PSD组相比较,蔗糖偏好指数明显增加(P<0.05),差异具有统计学意义;1.4体重测量结果:在大鼠MCAO术后31天时,PSD组与卒中+DMSO组比较体重增加明显减少(P<0.05);PSD+JNK抑制剂组与PSD组相比较体重明显增加(P<0.05),差异具有统计学意义。2.蛋白印迹结果显示:与正常对照组相比较,PSD组海马区域JNK(P<0.01)、P-JNK(P<0.001)、c-jun(P<0.001)、caspase3(P<0.001)的表达明显升高;与MCAO+DMSO组相比较,PSD组海马组织JNK(P<0.05)、P-JNK(P<0.05)、c-jun(P<0.05)、caspase3(P<0.01)的表达明显升高;与PSD组相比较,PSD+JNK抑制剂组海马组织JNK(P<0.05)、P-JNK(P<0.01)、c-jun(P<0.05)、caspase3(P<0.01)蛋白表达的明显下降,具有统计学差异性;P-JNK与JNK的比值两组之间相比较,统计学上无差异性(P>0.05),但PSD组P-JNK/JNK的比值有升高的趋势,SP600125能够降低其趋势。3.RT-PCR结果显示:与正常对照组相比较,PSD组海马区域IL-1β(P<0.001)、IL-6(P<0.001)和TNF-α(P<0.001)mRNA水平表达显著升高;与MCAO+DMSO组相比较,PSD组海马区域IL-1β(P<0.01)、IL-6(P<0.01)、TNF-α(P<0.05)mRNA水平表达明显升高;与PSD组相比较,PSD+JNK抑制剂组海马区域IL-1β(P<0.01)、IL-6(P<0.01)、TNF-α(P<0.05)的表达明显下降,具有统计学差异性。结论:结论1:MCAO大鼠ICV注射FC-TWEAK可诱导卒中后抑郁样行为模型。结论2:TWEAK可通过激活JNK信号通路的促炎、促凋亡作用导致卒中后大鼠的抑郁样行为。抑制JNK通路可下调炎症分子、促凋亡蛋白的表达,改善了PSD大鼠模型的抑郁样行为严重程度。结论3:TWEAK/Fn14相互作用经JNK信号通路调节炎性分子水平、细胞凋亡可能成为抗抑郁作用的潜在治疗靶点。