薯蓣炭疽病病原菌分离鉴定及抑菌制剂的筛选

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参薯(Dioscorea alata L.)、淮山(Dioscorea opposita Thunb.)是薯蓣科薯预属单子叶缠绕性藤本植物。全世界薯蓣科有10属约650种,而薯蓣属全世界约有600种之多,在我国南方,以参薯和淮山最为常见。然而,随着种植技术的不断发展,种植面积日益扩大,病害的发生频数也随之增加,其中以炭疽病为最严重的病害。它所造成的危害已成为薯蓣种植、生产的重要限制因子。因此,炭疽病的研究对今后薯蓣品种的选育、高产栽培和管理等方面提供理论依据具有重要意义。本研究通过对多个地区的病害调查,并采集了多份感病种质对炭疽病进行了分离、鉴定及其抗病性研究,得出以下主要结论:1、对薯蓣资源圃所种植的约300份材料进行了两年的炭疽病病害跟踪调查。统计发现:两年的调查数据存在一定的差异。2、采用组织块分离法从采集的样品中分离得到29株炭疽病病原菌。并采用4℃斜面和-20℃20%甘油两种方法将29株病原菌保存。3、对所分离的病原菌进行ITS分析以及ISSR分子标记。ITS分析表明:29株菌株均为胶孢炭疽菌;通过对100条引物筛选,得到12条扩增条带多、重复性好、条带清晰的引物,并对29株菌株进行ISSR分子标记分析,其遗传相似系数的变化范围为0.5437-0.9187。标记结果并没有按照地区或材料将其划分,说明病原菌在所采样区域没有地域性,也没有材料专化性。但是ITS序列分析与ISSR分子标记具一定的关联性。4、薯蓣抗炭疽病种质筛选。通过离体接种的方法,将参薯和淮山共计79份种质进行抗病测试,筛选出一批抗病性较好的种质。5、农药筛选以及生防菌的筛选。选用11种常见的化学农药进行筛选评价,结果表明:福.福锌、多菌灵、甲霜锰锌、代森锰锌、百菌清、甲基托布津、代森锌对炭疽病病原菌都具有一定的抑制效果,其中多菌灵效果最好;福福锌、甲霜锰锌、代森锰锌效果次之;扑海因、氢氧化铜和丙环唑对该病原菌没有抑制作用。通过平板对峙筛选实验,筛选得到一株编号为30104的土壤放线菌,对所分离的炭疽病病原菌具有一定抑制作用,其抑菌带大小在2.2cm左右,抑菌率约为50%。6、对菌株30104进行发酵实验,采用发酵液和提取抗生素两种方法对病原菌进行了抑制效果评价,发现其对该病原菌均具有良好的抑制效果。并对该菌株进行了16S rDNA系列分析,将该菌株鉴定为链霉菌。
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