胚胎植入是哺乳动物特有的生殖生理现象，在胚胎植入过程中胚胎滋养层对母体识别、黏附、侵入，而同时子宫内膜发生蜕膜反应，使滋养层细胞与母体建立紧密联系，从而有效的与母体进行营养物质和信息交换，它是胚胎与母体间复杂、精细、多因子双相调控的结果[1]。如果胚胎植入过程中任一环节的破坏，则可能影响妊娠结局。本研究将从复发性流产子宫蜕膜基因表达谱和E-cadherin基因启动子区甲基化对滋养层细胞的侵袭能力的调控两个角度探讨子宫内膜蜕膜化和滋养细胞侵袭对妊娠结局的影响。第一部分复发性流产患者子宫蜕膜基因表达谱目的从基因组角度分析复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者子宫蜕膜差异表达基因，为寻找不明原因RSA可能的发生机制及筛选特异性标志分子提供实验依据。方法分离RSA患者和正常早孕妇女的子宫蜕膜，提取RNA标记后用于表达谱芯片杂交，生物信息学分析芯片数据, RT-PCR验证芯片结果。结果1.与正常对照相比较，RSA患者蜕膜中共发现差异表达基因1656个，其中上调基因1184个，下调基因472个。2.基因功能分类显示差异表达基因涉及多个生物学过程和功能，包括代谢、细胞与细胞间作用、生殖、发育、外来刺激应激、细胞增殖、补体激活等。3.信号通路分析显示8个信号通路可能参与了RSA的发生，包括FoxO家族(FoxO family signaling)和Akt介导Class I PI3K(Class IPI3K signaling events mediated by Akt)等信号通路。4.半定量PCR验证表达谱芯片中RSA患者蜕膜异常表达基因，与正常对照相比较DKK1，GADD45A和GNLY基因表达显著上调，而DLK1的表达则显著下调，结果与基因芯片的结果有较好的一致性。结论RSA患者子宫蜕膜基因表达谱发生显著改变，这与RSA的发生密切相关。第二部分E-Cadherin启动子甲基化对人滋养细胞侵袭能力影响目的探讨粘附分子E-cadherin启动子区甲基化在胚胎植入过程中对滋养细胞的侵袭能力的调控作用。方法我们在前期Med-chip预测工作基础上，发现HTR-8/SVneo及JEG-3细胞E-cadherin基因启动子区存在差异甲基化状态，因而选取HTR-8/SVneo及JEG-3细胞株作为细胞模型，用甲基转移酶抑制剂5-aza-cdr处理2种细胞后检测E-cadherin表达是否发生了改变，MTT和Transwell方法分别检测5-aza-cdr对HTR-8/SVneo细胞增殖、凋亡及侵袭、迁移能力的影响。免疫组化检测早孕绒毛-蜕膜组织E-cadherin表达。结果1.绒毛-蜕膜组织免疫组化显示：侵入蜕膜组织的绒毛膜外滋养细胞（EVT）E-cadhein基因表达较细胞滋养细胞（CTB）表达显著降低。2. E-cadherin基因在HTR-8/SVneo低表达而在JEG-3细胞中高表达。细胞随着5-aza-cdr药物浓度增加，HTR-8/SVneo细胞E-cadherin基因mRNA及蛋白表达逐渐增加，而JEG-3细胞表达无显著差异。3. MTT和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡，筛选出处理HTR-8/SVneo细胞的最佳5-aza-cdr浓度为1μM和2.5μM时对细胞增殖和凋亡无影响。4.用浓度为1μM和2.5μM5-aza-cdr的培养基处理的HTR-8/SVneo细胞显示细胞增殖和凋亡无明显改变，Transwell实验检测侵袭及迁移能力与对照组相比显著减弱（p<0.05）。结论在胚胎植入过程中，受甲基化调控的E-cadherin基因的表达参与调控滋养细胞的侵袭及迁移能力，其表达水平可能与妊娠结局密切相关。