目的：基于蛋白质组学研究探索口腔鳞状细胞癌预测淋巴结转移的新型分子标记物。　　方法：⑴差异蛋白筛选实验方法：选取新鲜冰冻口腔癌组织20例，分淋巴结转移阳性12例和阴性8例，随机分组配对，采用二维双向电泳技术（2-DE），分离两组表达差异蛋白质位点，基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱（MALDI-TOF-TOF MS）鉴定差异蛋白质，并用Mascot数据库检索筛选出与淋巴结转移相关蛋白质。⑵采用免疫组化检测方法对104例福尔马林固定石蜡包埋的口腔鳞状细胞癌组织标本，其中淋巴结移组61例，无淋巴结转移组43例，检测差异表达上调蛋白谷胱甘肽转移酶P(GSTP),14-3-3η蛋白(14-3-3 eta protein),下调蛋白磷酸甘油酸酯激酶1（Phosphoglycerate kinase-1，PGK1）在口腔癌组织中的表达水平以及临床病理参数间的关系。⑶western blot方法检测8例新鲜冰冻口腔癌组织中上述蛋白质的表达情况。　　结果：①差异蛋白筛选实验采用双向凝胶电泳技术，共获得126个差异蛋白点，进行MADLDI-TOF-TOF MS鉴定，及Mascot数据库检索筛选出与淋巴结转移相关蛋白42个，上调蛋白28个；下调蛋白为14个。②从差异蛋白质中筛选出2个上调和1个下调蛋白：GSTP、14-3-3 eta protein和 PGK1对其在组织水平进行验证。这些蛋白参与多种信号通路调节细胞增殖、分化、凋亡、转录、粘附、血管形成、能量代谢等。③通过免疫组化检测方法对104例口腔鳞状细胞癌进行检测，淋巴结转移阳性组上调蛋白GSTP、14-3-3 eta和下调蛋白PGK1在口腔癌中表达的阳性率分别为50％（52/104），50.96%（53/104）,44.23%(46/104)；GSTP在口腔癌临床分期与淋巴结转移组中差异有统计学意义（P＜0.05），在临床病理参数年龄、肿瘤细胞分化程度中差异比较均无统计学意义（P＞0.05），推测GSTP与口腔鳞状细胞癌的进展（临床分期）和淋巴结转移相关，有望成为预测口腔癌淋巴结转移的分子标记物。14-3-3 eta与PGK1在口腔癌中的表达与临床病理参数（性别、年龄、临床分期、细胞分化程度和淋巴结转移）间比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；14-3-3 eta蛋白在口腔癌高分化组和中低分化组的阳性率分别为59.26%（16/27）、48.05%(37/77)，临床分期Ⅰ+Ⅱ期组和Ⅲ+Ⅳ组的阳性率分别为61.76%（21/34）、45.71%（32/70），淋巴结转移阴性与阳性组的阳性率分别为60.46%（26/43），44.26%（27/61）。各组间的表达阳性率对比来看，14-3-3 eta蛋白在口腔癌中低分化组，临床分期Ⅲ+Ⅳ组，淋巴结转移阳性组中出现表达下调趋势。由此推测其在口腔癌发生、发展中具有一定作用。④8例新鲜冰冻口腔癌组织进行western blot检测结果显示在上调蛋白14-3-3 eta和下调蛋白PGk1在淋巴结转移阳性与阴性组中的表达差异不明显，GSTP在淋巴结转移阳性组中表达有升高趋势。　　结论：⑴应用2-DIGE结合MALDI-TOF-TOF MS以及通过Mascot数据库检索鉴定，对OSCC淋巴结转移阳性组和阴性组间的表达差异蛋白进行分析，共获得126个表达差异蛋白位点，筛选出与淋巴结转移相关蛋白42个，上调蛋白28个，下调蛋白14个，这些蛋白质参与多种信号通路调节细胞内基因转录、蛋白质的翻译、合成、加工以及细胞自身增殖、分化、凋亡、粘附及血管形成等。⑵通过差异蛋白验证实验，我们发现GS TP在口腔癌中异常表达，与肿瘤的淋巴结转移呈正相关，有望成为预测口腔癌淋巴结转移的分子标记物。14-3-3 eta在口腔癌中肿瘤细胞中低分化组、临床Ⅲ+Ⅳ期组和淋巴结转移阳性组中表达有下调降低趋势，其在肿瘤细胞分化、生长、转移中可能起一定作用。⑶口腔癌的淋巴结转移是一个多步骤、多因素及各种细胞功能异常所导致的复杂病理的过程，这些差异蛋白质(42个表达差异蛋白)可以从蛋白质通路以及蛋白互作关系的角度筛选更敏感的蛋白，制作蛋白质芯片，引用于临床，对口腔癌淋巴结转移的预测具有重要意义，为口腔癌淋巴结转移敏感因子的探索提供新的线索和依据。