论文部分内容阅读
HIV自1981年被发现以来,已经在全世界范围内扩散,对人类健康造成了极大的危害。目前,人们仍然没有找到彻底清除HIV的有效途径。这是由于HIV具有极高的突变能力,能够逃脱机体的体液免疫应答机制,长期潜伏在人体内。这是消灭HIV最大的难点。因此,加强对HIV的研究具有重要意义。
常规的针对HIV的研究往往需要用到具有高危险性的HIV真病毒,因此对实验的硬件条件及实验技能要求较高,不利于大规模应用。而HIV假病毒由于只能进行一次感染,具有较高的生物安全性,对实验的硬件要求较低,可以替代HIV真病毒在HIV相关领域研究中的作用。
本研究通过对实验室保有的16株HIV-1病毒株的env序列进行克隆构建,成功构建了16个能够正确表达相应HIV包膜蛋白的env表达克隆。利用四质粒共转染的方法包装HIV-1假病毒。本研究中用于包装HIV-1假病毒的报告基因有GFP、RFP、β-gal和luciferase四种,每种报告基因有相对应的检测仪器和方法。结果表明,16株分别携带四种不同报告基因的HIV-1假病毒都可以通过四质粒共转染的方法包装出来,但滴度普遍较低,需要通过浓缩等手段加以提高。
HIV中和抗体在预防和控制HIV的感染及疫苗的设计等方面均有重要作用。利用HIV假病毒系统可以对HIV中和抗体的广谱中和能力进行系统的评价。在本研究中验证了构建的HIV-1假病毒系统可以应用于评价HIV-1中和抗体的中和能力及交叉反应强弱,对于HIV-1中和抗体性质的研究具有重要作用,为寻找广谱的HIV-1中和抗体及HIV疫苗的设计提供有力支持。