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介孔材料具有较高的比表面积、较大孔径及表面富含弱酸性羟基,在酶固定化方面的应用越来越广泛地受到关注。漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,具有相当广泛的底物专一性和较好的稳定性,因此漆酶在生物传感器方面,在治理含酚废水、纺织印染废水和造纸工业废水等方面有着巨大的应用前景。酶固定化技术是实现酶重复连续使用和稳定性改善的有效手段。本文以MCM-41和SBA-15两种具有代表性的不同孔径的介孔材料为载体,采用物理吸附法固定化漆酶。通过测定酶活,从固定化时间、pH值、给酶量三个因素确定了两种介孔材料为载体漆酶固定化的最适条件,并比较了游离漆酶和固定化漆酶的性质,最后还评价了固定化漆酶在降解污染物的情况。主要实验结果如下:合成了两种孔结构不同的介孔材料MCM-41和SBA-15,并对它们进行XRD和N2吸附-脱附表征,结果表明合成的材料均为介孔结构,平均孔径分别为4.261nm和5.366nm,比表面积分别为1042m2.g-1和888.1m2.g-1。优化了两种介孔材料为载体固定化漆酶的最适工艺条件,结果表明:当以介孔材料MCM-41为载体时,在室温下,0.1g载体中,加入5mL漆酶溶液(纯漆酶液被pH为3.0的缓冲溶液稀释800倍),固定化时间12h,漆酶的固定化效果最好;而以SBA-15为载体时,室温下,0.1g载体中,加入5mL漆酶溶液(纯漆酶液被pH为6.0的缓冲溶液稀释1200倍),固定化时间4.5h,得到的酶活最大。研究游离漆酶和固定化漆酶的性质,与游离酶相比,固定化漆酶与底物的亲和力均减小,稳定性均增强:固定化漆酶的Km值较游离酶均大,游离漆酶Km为0.211 mmol/L,而以MCM-41和SBA-15为载体的固定化酶Km分别为0.301 mmol/L和0.286 mmol/L;最适温度均同游离酶一样为55℃;以MCM-41为载体的固定化漆酶最适pH值为4.5,而以SBA-15为载体的为2.8,均与游离漆酶有所偏移;热稳定性、pH值稳定性较游离酶均有显著的提高,并且固定化漆酶具有较好的间歇操作稳定性,连续反应8批次后,酶剩余活性仍保持在50%以上。利用固定化漆酶对刚果红有机染料进行了脱色研究,实验表明:固定化漆酶在2h内能使刚果红(浓度为167mg/L)脱色99.9%。