论文部分内容阅读
目的:观察经TGF-β1siRNA、TIMP-1 siRNA、TIMP-2 siRNA治疗前后的肝纤维化大鼠的干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)及白细胞介素-13(IL-13)的变化,探讨TGF-β1siRNA、TIMP-1 siRNA、TIMP-2 siRNA治疗肝纤维化大鼠相关细胞因子的变化。方法:采用前期所构建的TGF-β1siRNA、TIMP-1 siRNA、TIMP-2 siRNA治疗前后的肝纤维化大鼠肝脏组织作为研究对象,根据所干扰靶基因不同分为A组(包括正常组、模型组、阴性对照组以及TGF-β1siRNA治疗组)和B组(包括正常组、模型组、阴性对照组、TIMP-1 siRNA治疗组以及TIMP-2 siRNA治疗组),将保存于福尔马林中大鼠肝脏组织石蜡包埋,切片进行免疫组化检测肝脏组织内Th1细胞因子IFN-γ,Th2细胞因子IL-4、IL-13的表达;将保存于液氮中肝脏组织分别采用Western blot检测IFN-γ以及IL-4、IL-13蛋白的表达, Real-time PCR检测IFN-γ以及IL-4、IL-13mRNA的表达。结果:A组与B组中模型组及阴性对照组大鼠肝脏组织内Th1细胞因子IFN-γ表达均明显低于其正常组,而Th2细胞因子IL-4、IL-13表达明显高于其正常组(P<0.05);A组中TGF-β1siRNA治疗组IFN-γ表达明显高于模型组,而IL-4、IL-13的表达与模型组及阴性对照组无明显差异(P>0.05);B组中TIMP-1 siRNA治疗组、TIMP-2 siRNA治疗组IFN-γ表达明显高于模型组,且IL-4、IL-13的表达明显低于模型组( P<0.05)。结论:在大鼠肝纤维化时有Th2细胞因子IL-4、IL-13表达的增多,而Th1细胞因子IFN-γ明显减少,证明大鼠肝纤维化时存在Th1/Th2细胞因子失衡,表现为Th2极化。TGF-β1 siRNA、TIMP-1 siRNA、TIMP-2 siRNA均对大鼠肝纤维化有治疗效果。但在干扰TGF-β1表达后,IL-4及IL-13无明显降低,联系IL-4及IL-13促纤维化的生物学特性可知,这不利于肝纤维化的恢复;而干扰下游因素TIMP-1、TIMP-2的表达后,在直接降解胶原的同时,还可抑制IL4、IL13的表达,这使Th2细胞因子刺激胶原表达的机制受到了抑制,显然更有利于抗肝纤维化治疗。