脂联素对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及调控机制的研究

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目的:研究人脂联素重组蛋白(Acrp30)对人乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡作用及其可能机制,为Acrp30的临床应用提供实验和理论依据。方法:应用MTT法检测Acrp30对MCF-7人乳腺癌细胞株的抗增殖作用及细胞毒活性;通过倒置显微镜、吖碇橙(AO)/溴化乙啶(EB)荧光染色、Annexin V/PI双染法观察肿瘤细胞的形态学改变;应用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率的变化;应用荧光分光光度计法检测用药前后caspase-3的含量变化,探讨Acrp30对凋亡通路的影响。结果:(1)用MTT法检测结果表明,Acrp30在体外对MCF-7人乳腺癌细胞株增殖有明显的抑制作用,实验组与对照组相比其生长抑制率有显著差异(P<0.01),而且这种抑制作用呈现浓度依赖性;(2)倒置显微镜观察表明,实验组可见胞核固缩、碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化;(3)经AO/EB荧光染色、AnnexinV/PI双染法观察结果表明,实验组出现凋亡细胞;(4)流式细胞仪结果表明实验组凋亡率明显增加;(5)Caspase-3含量检测结果表明,实验组caspase-3含量增高,与对照组比差异显著(P<0.01)。结论:(1)Acrp30在体外显著抑制MCF-7人乳腺癌细胞株增殖及诱导其凋亡;(2)Acrp30诱导凋亡作用机制之一可能与细胞周期发生G0/G1期阻滞有关;(3)Acrp30对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响机制可能是通过增加caspase-3含量而起作用的。
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