论文部分内容阅读
目的观察蛇六谷和莪术提取物对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的影响,以及对趋化因子和粘附分子蛋白和mRNA表达的变化。为临床中医药抗乳腺癌提供实验依据。方法以蛇六谷石油醚萃取物、蛇六谷乙酸乙酯萃取物、蛇六谷正丁醇萃取物、蛇六谷水提物、莪术石油醚萃取物、莪术乙酸乙酯萃取物、莪术正丁醇萃取物、莪术水提物干预人三阴性乳腺癌肺转移细胞株MDA-MB-231,以表阿霉素为阳性对照,以生理盐水为阴性对照,CCK-8法检测各组药物对MDA-MB-231细胞株的抑制增殖作用;transwell小室测定细胞体外迁徙能力;流式细胞仪检测法检测细胞周期的变化;Western Blot、RT-PCR法检测粘附因子E-cadherin、E-selectin和趋化因子CCR7、SLC、SDF-1、CXCR4蛋白表达和基因表达。结果①表阿霉素、蛇六谷石油醚萃取物、高浓度蛇六谷乙酸乙酯萃取物、莪术石油醚提取物、莪术乙酸乙酯萃取物和高浓度的莪术水提取对MDA-MB-231细胞生长均有明显抑制作用,莪术石油醚提取物抑制作用最强,其差异有统计学意义,P<0.05。②表阿霉素、蛇六谷的石油醚提取物和水提物、莪术的石油醚、乙酸乙酯、水提取物均有抑制MDA-MB-231细胞体外侵袭的作用,与生理盐水对照组相比P<0.05,其中以表阿霉素作用最为显著,中药提取物种以莪术石油醚提取物组作用最为显著,蛇六谷石油醚提取物组次之,两者之间经统计学处理P<0.05。③经流式细胞仪分析,表阿霉素和莪术的石油醚、乙酸乙酯提取物均可提高体外生长MDA-MB-231细胞G1期细胞比率,降低S期和G2细胞数(P<0.05);而蛇六谷石油醚提取物则将231细胞阻滞在S期(P<0.05),使得细胞无法完成DNA复制而进入G2期。④莪术石油醚提取物可显著下调细胞粘附因子E-selectin蛋白表达(p<0.05),降低细胞趋化因子CCR7和CXCR4蛋白的表达(p<0.05);蛇六谷石油醚提取物可下调细胞粘附因子E-selectin蛋白表达(p<0.05),降低细胞趋化因子CCR7蛋白的表达(p<0.05);且莪术石油醚提取物作用均超过蛇六谷石油醚提取物组(p<0.05)。⑤莪术石油醚提取物可显著提高细胞粘附因子E-cadherin mRNA表达(p<0.05),降低细胞粘附因子E-selectin和趋化因子CCR7、SLC和CXCR4mRNA的表达(p<0.05);蛇六谷石油醚提取物则可显著下调细胞粘附因子E-selectin蛋白表达(p<0.05),降低细胞趋化因子CCR7、SLC和CXCR4的mRNA表达(p<0.05);且与蛇六谷石油醚提取物组相比,莪术石油醚提取物作用超过蛇六谷石油醚提取物组(p<0.05)。结论本研究结果证实了蛇六谷和莪术抗三阴性乳腺癌的作用,并发现莪术石油醚萃取物和蛇六谷石油醚作用最强,对MDA-MB-231细胞的抑制作用可能是通过上调粘附因子E-cadherin表达,下调粘附因子E-selectin和趋化因子CCR7、SLC、CXCR4表达有关。