活性氧（reactive oxygen species,ROS）信号在植物的多层免疫系统中起重要作用,拟南芥中活性氧信号是由位于细胞质膜的呼吸爆发氧化酶RBOHD（respiratory burst oxidase homolog D）产生。胞质类受体激酶RIPK（RPM1-induced protein kinase）调控了多层免疫系统中的活性氧信号,RIPK可以直接磷酸化激活RBOHD,同时也激活NADP-ME2（NADP-malic enzyme 2,ME2）产生NADPH,为RBOHD提供电子。但植物免疫中RIPK是如何被激活的还不清楚。本文对RIPK被激活的分子机制做了进一步深入研究,取得如下成果:1.鉴定了RIPK的磷酸化位点。几丁质受体CERK1（chitin elicitor receptor kinase 1）和3-羟基癸酸受体LORE（lipopolysaccharide-specific reduced elicitation）可以直接磷酸化RIPK,质谱分析鉴定了RIPK被CERK1和LORE磷酸化的三个共同位点,即RIPK S251、T252和T423。2.RIPK S251和T252位点突变使RIPK激酶活性丧失。通过利用去磷酸化和模拟磷酸化RIPK回补突变体（ripk-c33）,表明T423位点磷酸化在RIPK调控活性氧迸发中不起主要作用,而S251和T252位点参与调控了RIPK介导的活性氧迸发,并且植物不同层次免疫系统均诱导了RIPK S251和T252位点磷酸化。而RIPK S251和T252位点突变导致RIPK激酶活性丧失。3.激酶活性丧失的RIPK对活性氧信号具有显性负效应。RIPK G237R的突变也是导致RIPK激酶活性丧失。在野生型背景下过量表达RIPKG237R,发现其对活性氧迸发具有显性负效应。进一步的分析表明,RIPKG237R没有抑制RIPK和其它胞质类受体激酶磷酸化RBOHD的能力,也不抑制内源RBOHD及其它胞质类受体激酶的磷酸化水平。但RIPKG237R与产生NADPH的酶NADP-ME2的互作更强,因此激酶活性丧失的RIPK对活性氧信号的显性负效应的分子机制还有待进一步研究。