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本文主要从以下几个部分展开论述：
第一部分 Ipilimumab的药代动力学研究
目的:本文旨在研究抗体药物ipilimumab在临床前小鼠模型C57BL/6J小鼠，CTLA4人源化小鼠以及CTLA4人源化荷瘤小鼠中的药代动力学行为。
方法:通过静脉注射(i.v.)和腹腔注射(i.p.)两种给药方式给不同模型小鼠ipilimumab。采用建立的生物素．亲和素酶联免疫吸附方法(BA-ELISA)测定小鼠血浆中ipilimumab的浓度，并使用PhoenixWinNolin软件分析其药代动力学参数。
结果:当以腹腔注射的方式分别给予C57BL/6J小鼠0.3，1.0，10.0mg/kg剂量的ipilimumab时，随着给药剂量的增加，Cmax和AUC0-last吼呈现增加的趋势。此外，对于不同模型的小鼠，当腹腔注射10.0mg/kg的剂量时，其药动学参数存在差异:荷瘤CTLA4人源化小鼠(12925.7h*μg/mL)中AUC0-last显著高于野生型C57BL/6J小鼠（9385.7h*μg/mL）和CTLA4人源化小鼠（7691.6h*μg/mL）。然而，C57BL/6J小鼠(175.5h)中的t1/2显著长于CTLA4人源化小鼠(26.7h)以及CTLA4人源化荷瘤小鼠(27.0h)。当静脉注射3.0mg/kgipilimumab于野生型C57BL/6J与CTLA4人源化荷瘤小鼠时，其药动学参数Cmax在人源化荷瘤小鼠(95.8ug/mL)显著高于野生型C57BL/6J小鼠(31.6ug/mL);此外，野生型C57BL/6J小鼠(462.3h)中的t1/2显著长于CTLA4人源化小鼠(26.8h)，并且ipilimumab在CTLA4人源化小鼠中的清除率(0.98mL/h/kg)明显高于野生型C57BL/6J小鼠(0.48mL/h/kg)中的清除率。这些结果表明ipilimumab与CTLA4的特异性结合可能会影响ipilimumab在体内的清除率。
结论:抗体药物ipilimumab在不同小鼠模型中的药代动力学参数存在差异。此外，由靶向介导的抗体药物处置(TMDD)相关的机制还需进一步研究。
第二部分 miR-34a突变体的抗肿瘤活性及其药代动力学研究
目的:miR-34a具有较强的临床抗肿瘤活性，但由于其具有较强免疫相关不良反应，而被终止于Ⅰ期临床试验。因此，本研究旨在探究miR-34a突变体的抗肿瘤活性及其药代动力学。
方法:对miR-34a-5p的3末端的碱基进行单点突变，通过CCK-8实验和异种移植瘤实验探究miR-34a突变体的抗肿瘤活性。采用转录组测序和双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-34a突变体的靶基因。此外，我们建立了用于定量测定miR-34a的qPCR方法，并将其应用于miR-34a体内药代动力学研究。
结果:当miR-34a的3末端8号位点的G突变为A时即突变体MRX21，在癌细胞中具有出最强的抗肿瘤活性。MRX21在人结直肠癌细胞株HCT116、HCT-8、人胃癌细胞SGC-7901中的/Cs。值分别为1.727±1.10nM、13.53±1.07nM和10.66+1.08nM。裸鼠异种移植实验的结果显示MRX21对肿瘤生长具有显著抑制作用。此外，经MRX21处理的HCT116细胞中，表达显著下调的基因有59个和上调的基因有99个。我们通过qPCR验证了9种下调基因，包括AURKA，AURKB，CDK1，CKS2，PDGFA，PLK1，JAK2，KIF11和PTCH1。此外，miR-34a的药代动力学研究显示，MRX21在小鼠体内的AUC0-last为68132.61±17081.65h*ng/ml，MRT0-last为4.67±0.5h。
结论:MRX21具有较强的体内外抗肿瘤活性，此外，其可通过调控多种致癌基因发挥抗肿瘤作用。
第一部分 Ipilimumab的药代动力学研究
目的:本文旨在研究抗体药物ipilimumab在临床前小鼠模型C57BL/6J小鼠，CTLA4人源化小鼠以及CTLA4人源化荷瘤小鼠中的药代动力学行为。
方法:通过静脉注射(i.v.)和腹腔注射(i.p.)两种给药方式给不同模型小鼠ipilimumab。采用建立的生物素．亲和素酶联免疫吸附方法(BA-ELISA)测定小鼠血浆中ipilimumab的浓度，并使用PhoenixWinNolin软件分析其药代动力学参数。
结果:当以腹腔注射的方式分别给予C57BL/6J小鼠0.3，1.0，10.0mg/kg剂量的ipilimumab时，随着给药剂量的增加，Cmax和AUC0-last吼呈现增加的趋势。此外，对于不同模型的小鼠，当腹腔注射10.0mg/kg的剂量时，其药动学参数存在差异:荷瘤CTLA4人源化小鼠(12925.7h*μg/mL)中AUC0-last显著高于野生型C57BL/6J小鼠（9385.7h*μg/mL）和CTLA4人源化小鼠（7691.6h*μg/mL）。然而，C57BL/6J小鼠(175.5h)中的t1/2显著长于CTLA4人源化小鼠(26.7h)以及CTLA4人源化荷瘤小鼠(27.0h)。当静脉注射3.0mg/kgipilimumab于野生型C57BL/6J与CTLA4人源化荷瘤小鼠时，其药动学参数Cmax在人源化荷瘤小鼠(95.8ug/mL)显著高于野生型C57BL/6J小鼠(31.6ug/mL);此外，野生型C57BL/6J小鼠(462.3h)中的t1/2显著长于CTLA4人源化小鼠(26.8h)，并且ipilimumab在CTLA4人源化小鼠中的清除率(0.98mL/h/kg)明显高于野生型C57BL/6J小鼠(0.48mL/h/kg)中的清除率。这些结果表明ipilimumab与CTLA4的特异性结合可能会影响ipilimumab在体内的清除率。
结论:抗体药物ipilimumab在不同小鼠模型中的药代动力学参数存在差异。此外，由靶向介导的抗体药物处置(TMDD)相关的机制还需进一步研究。
第二部分 miR-34a突变体的抗肿瘤活性及其药代动力学研究
目的:miR-34a具有较强的临床抗肿瘤活性，但由于其具有较强免疫相关不良反应，而被终止于Ⅰ期临床试验。因此，本研究旨在探究miR-34a突变体的抗肿瘤活性及其药代动力学。
方法:对miR-34a-5p的3末端的碱基进行单点突变，通过CCK-8实验和异种移植瘤实验探究miR-34a突变体的抗肿瘤活性。采用转录组测序和双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-34a突变体的靶基因。此外，我们建立了用于定量测定miR-34a的qPCR方法，并将其应用于miR-34a体内药代动力学研究。
结果:当miR-34a的3末端8号位点的G突变为A时即突变体MRX21，在癌细胞中具有出最强的抗肿瘤活性。MRX21在人结直肠癌细胞株HCT116、HCT-8、人胃癌细胞SGC-7901中的/Cs。值分别为1.727±1.10nM、13.53±1.07nM和10.66+1.08nM。裸鼠异种移植实验的结果显示MRX21对肿瘤生长具有显著抑制作用。此外，经MRX21处理的HCT116细胞中，表达显著下调的基因有59个和上调的基因有99个。我们通过qPCR验证了9种下调基因，包括AURKA，AURKB，CDK1，CKS2，PDGFA，PLK1，JAK2，KIF11和PTCH1。此外，miR-34a的药代动力学研究显示，MRX21在小鼠体内的AUC0-last为68132.61±17081.65h*ng/ml，MRT0-last为4.67±0.5h。
结论:MRX21具有较强的体内外抗肿瘤活性，此外，其可通过调控多种致癌基因发挥抗肿瘤作用。