第一部分吗啡对家兔窦房结细胞自发电生理活动的效应。 目的：近年来对阿片受体的研究工作取得了很大的进展，除了阿片类作为镇痛药在临床的广泛应用外，吗啡也普遍用于急性心肌梗塞的镇痛及心脏手术的术前用药，阿片受体还参与了体内多个系统的病理过程，如对兔心供体保存的保护作用和对大鼠急性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用等。特别是阿片受体激动参与缺血预适应的心肌保护作用，使人们更加关注阿片受体与心血管系统的关系。但吗啡对于无神经递质作用的离体兔窦房结细胞自律性有何影响，国内外尚少见报道。本实验利用细胞内玻璃微电极技术，研究了吗啡对于离体兔心窦房结的电生理效应，重点探讨了其影响窦房结自律性的作用机制。 方法：取健康家兔，雌雄不拘，体重2.5-3.5kg，击枕部致昏，颈动脉放血，然后迅速开胸取出心脏，浸泡于氧饱和的冷(0-4℃)K-H液中，分离出窦房结，将离体标本心内膜面向上，固定于恒温浴槽底部的硅胶上恒温(36.0±0.5℃)，恒速(4ml/min)灌流。标本稳定一段时间后，应用细胞内玻璃微电极技术记录兔窦房结自律细胞动作电位，动作电位经微电极引出后，经镀氯化银的银丝输入微电极放大器，最后由计算机的医学信号采集及分析软件记录并分析跨膜动作电位。观察并记录窦房结自律细胞的自发放电频率(RSF)、动作电位幅值(APA)、0相最大上升速率(V<,max>)、4期自动除极速度(VDD)、复极50％的动作电位时程(APD<,50>)、复极90％的动作电位时程(APD<,90>)，并观察药物对动作电位各参数的影响。 结果：(1)正常窦房结自律细胞的动作电位幅值(APA)为65.7±2.7，0期最大上升速率(V<,max>)为6.1±3.2，4期自动除极速度(VDD)为50.1±3.3，自发放电频率(RSF)为167.5±5.4，复极化90％(APD<,90>))的时间为155.4±12.3。 (2)吗啡10<-5>mol/L、10<-4>mol/L、10<-3>mol/L剂量依赖性地降低窦房结细胞的APA、V<,max>、VDD和RSF。吗啡10<-5>mol/L使窦房结细胞的APA降至62.9±8.3，V<,max>降至5.8±2.6，VDD降至48.6±3.7，RSF降至163.8±4.2；吗啡10<-4>mol/L使APA、V<,max>、VDD和RSF分别降至57.9±5.3，4.9±1.8，45.1±6.6及155.8±6.2；吗啡10<-3>mol/L使APA、V<,max>、VDD和RSF分别降至53.5±3.8，4.0±1.3，39.2±5.3及150.8±5.9。(3)应用L型钙通道开放剂Bay K8644(0.25gmol/L)或者提高灌流液中钙离子浓度(5nmol/L)均可增加动作电位的APA、V<,max>、VDD和RSF，同时应用吗啡(10<-4>mol/L)可对抗由Bay K8644和高钙引起的窦房结细胞的兴奋效应。(4)应用阿片受体拮抗剂纳洛酮(10μmol/L)后，吗啡对窦房结细胞的作用消失。 结论：(1)吗啡可剂量依赖性地抑制家兔窦房结的自发放电活动。 (2)吗啡的电生理效应与其抑制钙离子内流有关。 (3)吗啡的电生理效应可被阿片受体拮抗剂纳洛酮完全阻断，吗啡的作用是由激动阿片受体引起的。 第二部分吗啡对离体豚鼠乳头肌电生理特性的影响。 目的：受体放射配基结合实验表明，除中枢神经系统外，外周组织亦存在阿片受体及内源性阿片肽，外周组织阿片受体对其所存在的器官的多种功能，具有重要的调节作用，阿片肽可由心脏自身合成，释放，以自分泌或旁分泌的方式调节正常心脏活动。吗啡为阿片受体激动剂，已被证明能降低大鼠心肌缺血后再灌注心律失常(RPAr)的发生率，但其对心脏的直接作用研究甚少，尤其对心肌电生理的影响缺乏研究，其心肌保护、抗心律失常作用的机制也不清楚。为了研究吗啡对心血管保护作用机制，采用玻璃微电极技术观察吗啡对豚鼠心室肌细胞动作电位(AP)及钙电流的影响。 方法：选用体重300-350g成年豚鼠，雌雄不拘，击昏后迅速开胸，取出心脏，置于95％O<,2>与5％CO<,2>混合气体饱和的K-H液中，打开右心室，选择分支少，大小约0.6mm×1mm×3 mm的柱状乳头肌，固定于恒温浴槽底部的硅胶上，用K-H液恒温恒速灌流标本，采用标准玻璃微电极技术记录心肌细胞电活动，由刺激器提供波宽1ms，频率1HZ，强度为1.5倍阈刺激的方波信号，以双极起博电极以场刺激驱动标本，产生动作电位，动作电位经微电极引出后，经镀氯化银的银丝输入微电极放大器，最后由计算机的医学信号采集及分析软件记录并分析跨膜动作电位。观察静息膜电位(RP)、动作电位幅值(APA)、0相最大上升速率(V<,max>)、复极50％的动作电位时程(APD<,50>)、复极90％的动作电位时程(APD<,90>)。 结果： (1)吗啡10<-5>mol/L、10<-4>mol/L、10<-3>mol/L可剂量依赖性的缩短乳头肌细胞的动作电位时程(APD)，动作电位复极化50％时间(APD<,50>)及动作电位复极化90％时间(APD<,90>)，APD由对照组的179.3±5.5ms分别降至171.0±4.9ms，163.7±6.6ms，149.5±7.8ms；APD<,50>由对照组的147.7±8.6 ms分别降至140.3±7.4 ms，129.7±2.6 ms，118.4±3.7ms；APD<,90>由对照组的164.1±5.7 ms分别降至159.8±9.5ms，148.3±5.5ms，133.5±6.3ms。(2)ISO(50μmol/L)可显著延长乳头肌细胞APD并诱发心室肌细胞产生早后除极(EAD)，其发生率为100％，吗啡(10<-3>mol/L)可明显降低ISO所致的APD延长，并完全抑制ISO引发的早后除极(EAD)。(3)应用L型钙通道开放剂Bay K8644(0.25μmol/L)可增加动作电位的APD、APD<,50>、APD<,90>，吗啡(10<-3>mol/L)可完全逆转Bay K8644(0.25μmol/L)对乳头肌细胞的兴奋效应。(4)模拟缺血再灌注。缺血后，无论是对照组还是吗啡组，乳头肌的APD<,30>、APD<,50>、APD<,90>均随缺血时间延长而降低。再灌注后，对照组和吗啡组APD<,30>、APD<,50>、APD<,90>均随灌注时间延长而延长，再灌注15min时，对照组基本恢复到缺血前的水平。而在吗啡组时，在20分钟时才基本恢复到缺血前水平且对照组8例标本均发生了再灌注心律失常，而吗啡组未出现心律失常。 结论：吗啡可缩短正常乳头肌细胞的动作电位时程，并对抗ISO所致的EAD，抑制钙通道开放剂Bay K8644所致的APD延长。吗啡减少再灌注心律失常的发生，对缺血再灌注损伤有直接的电生理保护作用。吗啡的电生理效应与其抑制钙离子内流有关。