产二元酸的热带假丝酵母酰基辅酶A氧化酶基因的研究

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tiancejiangjun
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该论文工作首次对所内用于工业生产的热带假丝酵母POX4和POX5基因进行了克隆和测序.测序结果表明,这两个基因可能与菌株的弱β-氧化能力无关.其中,POX5与GenBank中POX5存在差别.在克隆这些基因的工程中,总结出一种简易的PCR产物克隆方法.对POX4、POX5编码的蛋白PXP4、PXP5进行了同源性分析.在Pfam数据库中分析并预测二级结构后,推测了蛋白辅基FAD的结合区域.在酵母基因工程操作中常使用G418作为筛选药物,但G418对热带假丝酵母的抑制作用不强.因此,我们克隆了热带假丝酵母URA3基因.从测序情况看,我们得到的URA3基因能用作基因破坏的筛选标志.用EMS诱变β-6菌株,经大量筛选,得到了一株Ura<->营养缺陷型菌株.这些工作为基因工程改造热带假丝酵母打下了基础,并对改造工作进行了探索.
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