鸭细小病毒病由鸭细小病毒(Duck parvovirus,DPV)引起的一种急性病毒性传染病,以雏鸭为易感,临床症状主要表现为气喘,脚软和渗出性肠炎,死亡率约50%～80%。近20年来,在我国福建、广东、广西、浙江、台湾等地养鸭场经常爆发;法国、匈牙利、美国等地也频见报道,该病的流行是制约鸭养殖业发展的重要因素之一。DPV归属于细小病毒科细小病毒属,为单链DNA病毒,本文针对2004年2～4月间浙江省宁波地区多个鸭养殖场爆发的疫病开展了以下研究工作:鸭细小病毒04Nb株的分离鉴定:采集浙江宁波地区以腹泻、呼吸困难为主要症状,濒于死亡病鸭肝组织,采用接种鸭胚尿囊腔法增殖病毒,雏鸭感染实验显示发病症状及病理变化明显,死亡率为75%;分离纯化病毒,电镜下可见直径约20nm左右的球形病毒粒子;免疫琼脂扩散实验结果显示与鸭细小病毒标准株阳性血清有明显沉淀线;经SDS-PAGE呈现3条结构蛋白带,与DPV标准株一致;参照GenBank DPV非结构蛋白基因序列设计引物,PCR扩增反应获得目的条带,克隆测序后,与DPV代表株序列同源性达98%。综合以上生物学和分子生物学的实验结果,引起本次鸭场疫病的病原确定为DPV,并命名为鸭细小病毒04Nb(DPV-04Nb)株。在国内首次完成了DPV-04Nb株基因组序列测定:通过BLAST分析同源性,结果显示DPV-04Nb株rep基因核苷酸序列与GENBANK中DPV参考毒株同源性为98%以上,与鹅细小病毒(Goose Parvovirus GPV)同源性为80%左右;而vp基因核苷酸序列与DPV参考毒株同源性约为87%,与GPV同源性为89%左右,表明该DPV-04Nb株有较大的核苷酸变异性,推测VP抗原高突变可能源于宿主的免疫压力。采用Clustal X软件进行序列比对,以Phylip3.5软件构建进化树,结果表明,DPV-04Nb株在针对其rep基因的进化树中位于DPV组中;而在针对vp基因的进化树中,与GPV组的进化关系比DPV组更近一些,但是与地理分布没有明显的相关性。