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本文对九眼独活化学成分、组织培养、抗氧化活性及相关成分的含量测定方面进行了研究。
(1)采用乙醇浸泡提取法,通过硅胶柱层析和重结晶等分离方法,从九眼独活根中分离得到3个二萜成分,根据理化性质和UV、IR、NMR和MS等波谱学方法鉴定为:ent-pimara-8(14),15-diene-19-oic acid(AC1)、7α-hydroxy-ent-pimara-8(14),15-diene-19-oic acid(AC2)、7-oxo-ent-pimara-8(14),15-diene-19-oic acid(AC3)。同时建立了这三种二萜成分的RP-HPLc法为测试手段的含量测定方法,并以此法测定了四川5个产地九眼独活根中的含量,为建立九眼独活质量评价体系提供了科学依据。
(2)以单因素分析结合正交试验的方法,研究了九眼独活类黄酮超声辅助提取的工艺条件,利用清除DPPH自由基的能力和还原力作为指标测定了九眼独活类黄酮的抗氧化活性。结果表明:九眼独活类黄酮提取的优化工艺条件为乙醇体积分数30%,提取时间60min,固液比1:75,提取温度80℃,此时类黄酮的提取率为1.34%,九眼独活类黄酮对DPPH自由基有较好的清除效果,呈明显的剂量.效应关系,清除率达到78.88%,同时其还原力与浓度也呈现良好的线性关系(R2=0.9855)。
(3)以野生九眼独活的幼嫩叶片为材料,研究2,4-D分别与KT,6-BA的不同组合对九眼独活愈伤组织诱导的影响,结果表明,KT和6-BA会明显降低九眼独活愈伤组织诱导频率,对愈伤组织的生长有明显的抑制作用,但能降低愈伤组织的褐化程度;低浓度的2,4-D在愈伤组织诱导中起着重要作用,并能获得生长状态好的愈伤组织。通过愈伤组织继代培养及相关成分含量测定,最终筛选获得诱导九眼独活愈伤组织和继代培养的最适培养基,即MS+2,4-D0.2mg/L。