论文部分内容阅读
自从1983年世界上首次获得转基因植物以来,转基因技术得到了飞速的发展,而今已成为植物育种的一种重要手段,为葡萄的育种改良提供了一条新途径。当前葡萄再生率低是葡萄遗传转化的限制因子,虽然过去有许多葡萄组织培养的报道,但大多是侧芽的培养,不适宜转基因再生的要求。因此探索葡萄高效再生途径,建立完善且稳定的遗传转化体系,仍是今后工作的重点。本研究以葡萄栽培品种红宝石无核和砧木品种S04成年态为试材,经消毒、初代和继代培养后,再以无菌试管苗的叶片为外植体,对影响葡萄叶片再生的因素,如：基因型、植物激素的配比、接种方式和培养条件等进行了研究,成功的建立了红宝石无核、S04离体叶片再生体系。主要研究结果如下：1对葡萄单芽茎段采用0.1%升汞进行消毒,试验结果表明0.1%升汞处理13min效果最佳。2继代增殖培养：红宝石无核芽分化的最佳培养基为MS+6-BA0.8 mg/L+IBA0.2mg/L,增殖系数最高为7.8；S04芽分化的最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+IBA0.2 mg/L,增殖系数最高为9.4。3葡萄叶片再生：红宝石无核的叶片再生最佳培养基为MS+TDZ2.5mg/L+IAA0.05mg/L,最高再生率为23.1%；S04的叶片再生最佳培养基为MS+6-BA4.0mg/L+IBA0.10 mg/L,最高再生率为50.9%。植株的第1、2片完全展开的叶片较适合再生。将叶片远轴面向下的接种方式再生率高于近轴面向下的接种方式,一定时间(21d)的暗培养可以大大促进葡萄叶片的再生。4大多数再生芽均可以正常生根,再生芽生根的最适培养基为：1/2MS+IBA0.5mg/L+0.1%AC,该处理根系粗壮,须根多,芽苗生长茁壮,效果最为理想。组培苗生根后进行炼苗,敞口炼苗时间以6d为最好,有利于提高移栽成活率。