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研究背景:肺癌是所有癌症中发病率和死亡率最高的癌症。miR-155和miR-21在肺癌的发生、发展过程中起着重要的作用,然而miR-155和miR-21是如何促进肺癌的发生、发展机制仍不明确。研究目的:探讨miR-155和miR-21通过直接靶向SOCS6促进肺癌发生、发展;协同miR-155/21对肺癌发生、发展的促进作用优于单一 miR-155或miR-21对肺癌的促进作用,从而为临床找到一种可能更加有效的治疗肺癌的手段。材料和方法:(1)临床标本中首先检测了 80对肺癌患者癌与癌旁组织的miR-155、miR-21以及SOCS6的表达情况,并分析之间的相互关系;(2)体内实验选取细胞系A549和H1299作为肺癌的细胞株,分别在A549和H1299细胞系中抑制或过表达miR-155、miR-21以及miR-155/21,检测各组中基因SOCS6的mRNA及蛋白的表达情况;观察各组肿瘤细胞的增殖、活性、凋亡情况;(3)体外实验将转染miR-155、miR-21和miR-155/21的抑制剂A549细胞注射到裸鼠背部皮下,观察各组裸鼠后背肿瘤的成瘤以及基因SOCS6在肿瘤组织中的表达情况。结果:(1)临床标本实验,检测了 80对肺癌患者癌与癌旁组织,其中癌组织miR-155和miR-21的表达明显高于癌旁组织,同时SOCS6的表达明显低于癌旁组织,miR-155和miR-21与SOCS6的表达成反向关系;随着肿瘤分期进展,miR-155和miR-21的表达逐渐升高,而SOCS6的表达逐渐减低。(2)体外实验,促进或抑制miR-155、miR-21和miR-155/miR-21表达,均能抑制或促进SOCS6 mRNA及蛋白的表达;但协同促进或抑制miR-155/miR-21时,对SOCS6的抑制或促进效果优于单一miR-155或miR-21对SOCS6的作用效果;当过表达野生型miR-155、miR-21时,SOCS6-3’-UTR荧光活性明显减低,过表达突变型miR-155、miR-21,SOCS6-3’-UTR 荧光活性未见变化,证实 miR-155、miR-21 是通过直接靶向SOCS6的3’-UTR而降低其表达的。(3)体外实验,抑制miR-155、miR-21和miR-155/miR-21可以促进A549和H1299细胞的凋亡,同时也抑制了 A549和H1299细胞的增殖比率(细胞数目、活性、克隆数),但协同抑制miR-155/miR-21的效果无论在促进A549和H1299细胞的凋亡,还是在抑制A549和H1299增殖比率均优于单一抑制miR-155或miR-21的效果。(4)体内实验,裸鼠后背注射miR-155/21抑制剂组的肿瘤大小明显低于单纯注射miR-155或miR-21抑制剂组;免疫组化示:miR-155/21抑制剂组的SOCS6表达明显高于单一 miR-155或miR-21抑制剂组SOCS6的表达。结论:(1)临床患者标本、体外和体内实验证实,miR-155和miR-21是促进肺癌发生、发展的关键因子;(2) miR-155和miR-21是通过直接靶向SOCS6促进肺癌发生、发展;(3)协同抑制miR-155/miR-21对肺癌的抑制效果优于单一 miR-155或miR-21对肺癌的抑制效果。