1.目的肺纤维化是一种慢性、进行性加重的肺部疾病,由于其确切发病机制尚不明确,除肺移植以外,目前临床上尚无特效疗法。血管新生在肺纤维化形成中作用的证实是肺纤维化发病机制研究的重要发现,抑制异常血管新生可有效改善博莱霉素诱导的肺纤维化动物模型的病理改变。中医药辨证治疗肺纤维化具有丰厚的理论支持,本课题组前期研究已初步证实扶正剔邪搜络方对肺纤维化有一定的防治作用,但其效应机制尚不清楚。本研究在系统总结肺纤维化发病机制的现代研究进展及其中医辨证治疗经验基础上,通过复制肺纤维化大鼠模型,探究扶正剔邪搜络方防治肺纤维化的作用及其对肺血管新生的调控机制,以期为临床上应用扶正剔邪搜络方防治肺纤维化提供借鉴。2.方法本研究综合使用文献整理和动物实验两种研究方法。查阅近年肺纤维化血管新生机制研究的中外研究进展,梳理肺纤维化相关的古今医籍;复制博来霉素诱导肺纤维化大鼠模型,观察扶正剔邪搜络方对肺纤维化的防治作用,并探讨其调控肺纤维化大鼠肺血管新生的作用机制。将96只大鼠以随机数字表法分为对照组、模型组和治疗组,每组32只。经气管推注博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,分7天、14天、21天、28天四个时相进行肺功能、动脉血气分析、羟脯氨酸含量测定、组织形态学分析四项指标检测,以验证肺纤维化大鼠模型复制的成功与否以及扶正剔邪搜络方的治疗效果。检测各组大鼠肺组织中血管内皮生长因子在各个时相的表达情况以及单位面积肺组织微血管密度的变化,以判断肺纤维化大鼠异常肺血管新生活动的活跃性,研究扶正剔邪搜络方对肺纤维化大鼠肺血管新生的调控作用。3.结果(1)文献研究传统认为肺纤维化的发生由慢性炎症反应、损伤后异常修复所引起。随着研究的不断深入,对于肺纤维化发病机制的传统看法饱受争议,从血管新生角度研究肺纤维化成为了研究肺纤维化发生机制的新思路。经抗异常血管新生治疗可改善肺纤维化,但单一的进行抗/促血管新生治疗或许并不适于整个肺纤维进程。中医无肺纤维化之病名,根据肺纤维化的临床表现和病证特点,多从“肺痹”、“肺痿”论治,以整体辨证、局部辨证和微观辨证三种辨思路相结合,发现肺络痹阻、痿弱不用是其主要病机,痰、瘀、虚三者始终是其矛盾的主要方面并贯穿于肺纤维化病程的始终。肺痹为甚者,祛邪为主,重在开宣肺络,肺痿为甚者,扶正为先,寓通络于补益之中。(2)实验研究与对照组相比,模型组大鼠肺功能检测FVC降低、FEV0.25/FVC%升高、PEF降低,符合限制性通气功能障碍的特点;动脉血气分析PaO2下降,表现为低氧血症;肺组织羟脯氨酸含量升高;组织形态学分析显示模型组大鼠表现为肺泡炎症和胶原纤维过度沉积的特点。与模型组大鼠相比,扶正剔邪搜络方治疗组大鼠肺功能检测表明其限制性通气功能障碍程度较轻,提示扶正剔邪搜络方可以改善肺纤维化大鼠的限制性通气功能障碍;动脉血气分析结果PaO2较高,提示扶正剔邪搜络方可以改善肺纤维化大鼠的低氧血症;组织形态学分析显示,治疗组大鼠各时相肺泡炎症和胶原纤维沉积均轻于模型组。与对照组对比,模型组大鼠肺组织血管内皮生长因浓度在造模后第7天时达到较高水平,并逐渐降低。微血管密度较大,自造模后第7天开始肺组织微血管密度进行性增高,至造模后第21天左右达到峰值,第21天以后微血管密度开始降低。治疗组大鼠的血管内皮生长因子浓度和微血管密度的变化趋势与模型组相似,各个时相肺组织血管内皮生长因子浓度和微血管密度均低于模型组。4.结论(1)扶正剔邪搜络方可有效改善博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺限制性通气功能障碍和低氧血症,减轻博莱霉素诱导肺纤维化大鼠早期肺泡炎症,降低肺纤维化大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量,延缓和改善其肺纤维化。(2)扶正剔邪搜络方可有效抑制肺纤维化大鼠肺组织的异常血管新生,其对肺纤维化的治疗作用可能是通过抑制肺纤维化大鼠肺组织的异常血管新生活动实现的。