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目的:本实验旨在探讨津力达颗粒通过PI3K/AKT/GLUT4通路改善多囊卵巢综合征模型大鼠胰岛素抵抗机制的研究,以进一步探讨中医药对PCOS的治疗意义。方法:选择21日龄SD雌性大鼠50只,随机分为空白组和模型组,其中空白组10只,模型组40只。称量基础体重,模型组给予皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)6mg/100g体重/天+0.2mL注射用大豆油,连续注射20天,建立PCOS大鼠模型,空白组给予皮下注射同等剂量油剂。造模完成后,显微镜下观察两组大鼠阴道涂片以判断大鼠动情周期变化;模型组随机抽取8只处死,取卵巢组织行病理切片,判断PCOS造模结果。对两组大鼠行腹腔糖耐量试验(IPGTT),检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算HOMA-IR指数评估胰岛素抵抗。造模结束后,将模型组随机分为模型组、津力达组、二甲双胍组和津力达+二甲双胍组,每组8只,并分别给予津力达颗粒50mg/(kg.d)、二甲双胍0.265g/(kg.d)、二甲双胍0.265g/(kg.d)+津力达颗粒50mg/(kg.d)灌胃,每天1次,连续28天,模型组、空白组给予等量生理盐水灌胃,每天1次,连续28天。记录大鼠体重,每周1次。实验结束后,隔日行IPGTT试验,检测FBG、PBG60’、PBG120’以及FINS,计算HOMA-IR指数;HE染色观察各组大鼠卵巢病理结构变化。采用半定量逆转录酶链反应(qRT-PCR)法检测各组大鼠肝脏及卵巢PI3K mRNA、AKT mRNA、GLUT4 mRNA表达量;同时采用Western-Blot方法检测各组大鼠肝脏及卵巢p-PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白水平。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗缪勒氏管激素(AMH)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)。结果:造模结束后,模型组大鼠体重、FSH、LH/FSH高于空白组(P<0.05);血清LH、T、E2显著高于正常组(P<0.01)。阴道涂片结果提示模型组大鼠失去动情周期变化;卵巢组织HE染色结果提示模型组大鼠卵巢呈多囊样改变,卵泡腔增大,白膜明显增厚,闭锁卵泡增多,颗粒细胞层减少,卵泡细胞之间间隙增大。模型组大鼠FBG、PBG 60’、PBG 120’、FINS、HOMA-IR要显著高于空白组(P<0.01)。药物干预结束后,各组大鼠体重变化无统计学差异(P>0.05);津力达组较在PBG 60’、FINS及HOMA-IR水平要显著低于模型组(P<0.01);津力达+二甲双胍组能够显著降低FBG、PBG60’、PBG120’、FINS、HOMA-IR,(P<0.01)。在PI3K、AKT、GLUT4 mRNA表达量上,模型组在肝脏及卵巢PI3K、AKT、GLUT4 mRNA与空白组相比要显著降低(P<0.01);津力达组能够增加肝脏PI3K mRNA及卵巢PI3K、AKT、GLUT4 mRNA的表达(P<0.05);津力达颗粒与二甲双胍联用后,能够显著提高肝脏PI3K、GLUT4 mRNA的表达,(P<0.01),能够增肝脏加AKT mRNA表达,与模型组相比(P<0.05),并能够显著增加卵巢PI3K、AKT、GLUT4 mRNA的表达(P<0.01),且均高于单用二甲双胍组。在p-PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白表达水平,模型组较空白组在肝脏及卵巢表达水平显著减低(P<0.01);津力达组与模型组相比,在肝脏p-PI3K、p-AKT水平以及卵巢p-PI3K、GLUT4,显著增高,(P<0.05),并未发现在肝脏GLUT4及卵巢p-AKT有统计学差异,但均有增高趋势;与二甲双胍联合应用后,在肝脏及卵巢p-PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白表达有显著增加,(P<0.01)。模型组在FSH、T、LH/FSH、AMH水平较空白组增高,(P<0.05),并能够显著提高LH水平,与空白组相比,(P<0.01);津力达组能够降低FSH、LH、T、AMH水平,与模型组相比P<0.05;津力达与二甲双胍联用后,能够显著降低LH水平(P<0.01),并能够降低FSH、T、AMH,与模型组相比(P<0.05);各药物干预后卵巢HE染色,镜下可见卵巢多囊样变显著减少,二甲双胍组及二甲双胍+津力达组可见颗粒细胞层数减少以及扩张的囊形状卵泡;血脂方面,模型组TG水平较空白组增高(P<0.05),各药物干预组均可降低血清TG水平(P<0.05)。结论:津力达颗粒能够改善PCOS大鼠多囊样变和胰岛素抵抗,且与二甲双胍联用时,改善胰岛素抵抗作用更强;可能通过提高PI3K、AKT、GLUT4 mRNA的表达,增加PI3K、AKT、GLUT4蛋白合成,进而改善胰岛素抵抗;津力达颗粒能够降低模型大鼠LH、T、AMH水平,改善卵巢多囊样变化,同时津力达颗粒可以改善PCOS大鼠高甘油三酯血症状态。