人食管鳞癌核表达p75NTR细胞特性的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:socheapke
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目的:研究人食管癌组织中细胞核表达p75NTR细胞的干细胞特性。方法:1采用免疫组织化学技术检测p75NTR在食管鳞癌组织标本中的表达情况并分析其与各种预后因子的相关性。2采用无血清成球培养法培养人食管癌Eca109细胞,富集到第1代肿瘤干细胞球样细胞,并进行传代培养,得到第3代、第5代、第7代和第9代细胞球细胞。3采用免疫荧光法检测不同代次细胞球细胞中p75NTR的表达情况。4采用流式细胞术检测不同代次细胞球细胞的细胞周期。5采用Real time-PCR技术检测细胞球细胞ABCG2和ERCC1的表达情况。6采用CCK8法检测细胞球细胞的化疗药物抵抗能力。7采用动物体内成瘤实验检测不同代次细胞球细胞的成瘤情况。结果:1在71例食管癌组织标本中,有42例标本中的食管癌细胞表达p75NTR,p75NTR阳性表达的细胞中少数细胞p75NTR在细胞核表达且细胞核表达p75NTR的细胞成群分布;经统计学分析,发现细胞表达p75NTR的病例数与年龄、肿瘤直径和病理分级有关,而与性别(男性31/42,女性11/42)、Ki67的表达(25/42)和远处转移(12/42)没有相关性;细胞核表达p75NTR的病例与患者的年龄、肿瘤直径和病理分级有关,而与其他相关因素,例如:性别(男性25/31,女性10/11)、淋巴结转移(1/7)等,无显著相关性。2第1代(69.6%)、3代(74.8%)、5代(80.1%)、7代(79.5%)、9代(79.2%)细胞球细胞处于G0/G1期细胞随细胞球细胞代数的增长依次递增,而第5代以后细胞球细胞处于G0/G1期细胞比例没有明显变化。3第1代、3代、5代细胞球细胞ABCG2和ERCC1的表达量依次递增,而第5代以后细胞球细胞这两种基因的表达量没有明显变化。4第1代、3代、5代细胞球细胞对甲氨蝶呤、顺铂和紫杉醇的耐受能力依次增强,而第5代以后细胞球细胞对这三种化疗药物的耐受能力没有明显的变化。5第1代(5.32%)、3代(38.69%)、5代(100%)细胞球细胞中p75NTR核阳性表达细胞的比例随细胞球细胞代数的增长依次递增,而第5代以后细胞球细胞p75NTR的表达均为核阳性;第1代(0.092g)、3代(0.13g)、5代(0.22g)细胞球细胞的裸鼠成瘤能力依次增强,而第5代以后细胞球细胞的裸鼠成瘤能力无明显变化。结论:食管癌p75NTR核阳性细胞更具有干细胞的特性,通过多次细胞球培养可以纯化p75NTR核阳性的食管癌干细胞。
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