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背景:有研究表明炎症诱导的反应性星形胶质细胞失去一些生理功能并分泌一些损伤神经细胞的物质。这类具有神经毒性的反应性星形胶质细胞称为A1反应性星形胶质细胞。免疫蛋白酶体低分子量多肽7(low molecular masspolypeptide 7,LMP7)具有参与抗原呈递和免疫应答的功能,是免疫蛋白酶体中最重要的活性亚基。我们假设LMP7参与A1反应性星形胶质细胞的形成,抑制LMP7能减少A1反应性星形胶质细胞的形成。
目的:验证炎症刺激诱导A1反应性星形胶质细胞,并研究炎症诱导产生A1反应性星形胶质细胞的机制。
方法:1从出生1天内的新生大鼠脑中获得星形胶质细胞。2设置正常星形胶质细胞组、暴露于(Lipopolysaccharide ,LPS)的星形胶质细胞组与添加LMP7抑制剂的LPS暴露组。3使用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)、蛋白质免疫印迹(Western Blot , WB )技术、荧光定量PCR(quantitative real-time PCR , qPCR )法检测C3、LMP7、磷脂酰肌醇6(phosphatidylinositol 6,Gpc6),SPARC样1(SPARC-like 1,Sparcl1),IL-1β,TNF-α和脂质运载蛋白2(lipocalin 2,lcn2)的表达。
结果:1暴露于LPS的星形胶质细胞表达C3,而正常组几乎不表达。2暴露于LPS的星形胶质细胞在表达C3的同时表达LMP7、Gpc6、Sparcl1、IL-1β、TNF-α、lcn2,而正常组几乎不表达。3与单纯暴露于LPS的星形胶质细胞相比,给暴露于LPS的星形胶质细胞中加入LMP7抑制剂后C3、Gpc6、Sparcl1、IL-1β、TNF-α、lcn2的表达量都下降(P<0.05)。
结论:1LPS刺激产生A1反应性星形胶质细胞。2LPS刺激星形胶质细胞产生LMP7。3LPS通过调控LMP7产生A1反应性星形胶质细胞。4抑制LMP7能减少A1反应性星形胶质细胞的形成。
目的:验证炎症刺激诱导A1反应性星形胶质细胞,并研究炎症诱导产生A1反应性星形胶质细胞的机制。
方法:1从出生1天内的新生大鼠脑中获得星形胶质细胞。2设置正常星形胶质细胞组、暴露于(Lipopolysaccharide ,LPS)的星形胶质细胞组与添加LMP7抑制剂的LPS暴露组。3使用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA)、蛋白质免疫印迹(Western Blot , WB )技术、荧光定量PCR(quantitative real-time PCR , qPCR )法检测C3、LMP7、磷脂酰肌醇6(phosphatidylinositol 6,Gpc6),SPARC样1(SPARC-like 1,Sparcl1),IL-1β,TNF-α和脂质运载蛋白2(lipocalin 2,lcn2)的表达。
结果:1暴露于LPS的星形胶质细胞表达C3,而正常组几乎不表达。2暴露于LPS的星形胶质细胞在表达C3的同时表达LMP7、Gpc6、Sparcl1、IL-1β、TNF-α、lcn2,而正常组几乎不表达。3与单纯暴露于LPS的星形胶质细胞相比,给暴露于LPS的星形胶质细胞中加入LMP7抑制剂后C3、Gpc6、Sparcl1、IL-1β、TNF-α、lcn2的表达量都下降(P<0.05)。
结论:1LPS刺激产生A1反应性星形胶质细胞。2LPS刺激星形胶质细胞产生LMP7。3LPS通过调控LMP7产生A1反应性星形胶质细胞。4抑制LMP7能减少A1反应性星形胶质细胞的形成。