烟酸对外周血单核细胞中cAMP与ABCA1表达的作用

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目的:观察烟酸和PKA抑制剂Ro 31-8220单独及联合应用对体外培养的单核细胞中cAMP及ABCA1表达的影响,探讨烟酸调节ABCA1表达与cAMP/PKA途径的相关性。 方法:选取病人,通过冠脉造影及血脂检查分为三组:1.非冠心病人组(设为空白对照组);2.冠心病人高血脂组;3.冠心病人正常血脂组;其中2、3组均分别设有空白对照、烟酸、PKA抑制剂、烟酸+PKA抑制剂四个亚组。无菌采集病人股动脉血液标本,分离外周血单核细胞加以培养,各组细胞均孵育3~48小时。选择3、12、24和48小时等4个时间点,运用逆转录聚合酶链反应和Western blot蛋白印迹法分别检测ABCA1mRNA与ABCA1蛋白表达的变化,采用低pH值EIA法测定细胞内cAMP含量的变化,探讨烟酸对单核细胞中ABCA1与cAMP表达影响的相关性。 结果:①各组外周血单核细胞中ABCA1的表达及caMP的含量,在3h~48h这一时间段前后无明显变化(P>0.05);②冠心病高血脂组患者单核细胞中ABCA1的表达较非冠心病人组单核细胞中ABCA1的表达明显降低(P<0.05),而冠心病正常血脂组单核细胞中ABCA1的表达较非冠心病人组单核细胞中ABCA1的表达无明显差异(P>0.05);③烟酸单独作用能明显增加冠心病人高血脂组及冠心病人正常血脂组单核细胞中ABCA1的表达(P<0.05),同时使这两组单核细胞中cAMP的含量增加(P<0.05);④PKA抑制剂Ro 31-8220单独作用能明显降低冠心病人高血脂组及冠心病人正常血脂组单核细胞中ABCA1的表达(P<0.05),同时使这两组单核细胞中cAMP的含量降低(P<0.05);⑤烟酸与PKA抑制剂联合应用时,烟酸使冠心病人高血脂组及冠心病人正常血脂组单核细胞中ABCA1表达上调及cAMP的含量增加的作用被完全抑制(P<0.05)。 结论:①烟酸及Ro 31-8220对外周血单核细胞中ABCA1表达及cAMP含量的影响,与时间无明确相关性;烟酸药物作用稳定;②外周血单核细胞中ABCA1的表达与冠心病患者血浆胆固醇水平呈负相关;③烟酸可通过cAMP/PKA途径上调外周血单核细胞中ABCA1表达,使冠心病患者血浆HDL-C水平升高。
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