【摘 要】
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裸藻是独特的具有动植物双重特性的单细胞藻类,种类繁多且分布广泛。在漫长的进化过程中,裸藻对高盐、低p H、营养贫瘠、重金属污染等极端环境适应性强,但其拥有强大环境适应性的机理尚不清楚。本实验通过在CM培养基(对照组)里分别添加巴龙霉素(Paromomycin,PRM)(1μg m L-1、5μg m L-1、25μg m L-1)、氯化钠(Na Cl)(1%)、氯化镉(Cd Cl2)(0.5 m
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裸藻是独特的具有动植物双重特性的单细胞藻类,种类繁多且分布广泛。在漫长的进化过程中,裸藻对高盐、低p H、营养贫瘠、重金属污染等极端环境适应性强,但其拥有强大环境适应性的机理尚不清楚。本实验通过在CM培养基(对照组)里分别添加巴龙霉素(Paromomycin,PRM)(1μg m L-1、5μg m L-1、25μg m L-1)、氯化钠(Na Cl)(1%)、氯化镉(Cd Cl2)(0.5 m M、1 m M、1.5 m M)、酒精(0.5%、1%、1.5%)和葡萄糖(0.5%、1%、1.5%),分析其对纤细裸藻(Euglena gracilis)的生长、生化组分(副淀粉、叶绿素、类胡萝卜素、脂肪酸)及分子水平(转录组)的影响,初步探究纤细裸藻在复杂环境中可能的适应机制。主要结果如下:(1)葡萄糖和酒精均能促进纤细裸藻生长,而且葡萄糖比酒精的促进效果更为显著;而氯化镉、氯化钠和巴龙霉素会抑制纤细裸藻的生长。(2)酒精、葡萄糖、氯化钠及氯化镉处理均显著降低纤细裸藻细胞的叶绿素和类胡萝卜素含量,而巴龙霉素对这两种光合色素无显著影响。(3)巴龙霉素、氯化钠、氯化镉对裸藻细胞副淀粉含量无显著影响。而葡萄糖或酒精能显著促进副淀粉的合成,其中0.5%(m/v)的葡萄糖处理对细胞的副淀粉含量促进效果最为显著,相比对照组增加了486.60%;其次为0.5%(v/v)的酒精处理,增加了135.43%。(4)所有处理条件下裸藻细胞的脂肪酸含量均有不同程度的增加。葡萄糖促进脂肪酸含量的效果最明显,相比对照组增加了66.81%~307.78%;氯化镉处理组的促进效果最低,仅增加了18.96%~31.42%。除巴龙霉素外,在酒精、葡萄糖、氯化钠、氯化镉处理组中,脂肪酸的肉豆蔻酸(C14:0)占比、C11-C14脂肪酸占比、饱和脂肪酸占比均比对照组高。(5)对不同处理的纤细裸藻进行高通量二代转录组测序分析,没有发现预期的针对各种环境因子的核心基因群,且不同的处理条件对转录组的影响差别也很明显。氯化镉处理组中差异表达的基因个数最多,其次为碳源丰富的乙醇和葡萄糖处理组,氯化钠和巴龙霉素的最少。对部分与氨基酸代谢、糖类代谢、脂质代谢、光合作用、呼吸作用相关的基因进行详细描述与分析,涉及到67个酶,发现氯化镉、酒精、葡萄糖对这些基因表达的影响较大,巴龙霉素和氯化钠对这些基因表达的影响较小。(6)通过对纤细裸藻在不同处理下的生化组分与部分转录组进行联合分析,探究了氯化镉、酒精和葡萄糖处理组的物质转化和能量流动及调节的情况,分析了氯化钠处理组和巴龙霉素处理组的脂肪酸来源,并推测了各处理组对叶绿体产生的影响。综上所述,本论文重点比较了纤细裸藻在巴龙霉素、氯化钠、氯化镉、酒精、葡萄糖处理下的生化组分的变化,并在分子水平上对其进行转录组学方面的分析,初步探究了纤细裸藻应对复杂环境的主要适应机制,从而从抑制藻类繁殖方向为水华的治理提供理论指导,对裸藻活性物质的大规模生产也能提供一定的理论指导。
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