生物骨载体复合骨形态发生蛋白人工听小骨的动物实验研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ulvme2000
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目的:本次动物实验的目的就在于初步探讨生物骨载体复合骨形态发生蛋白人工听小骨的生物相容性及成骨效应.方法:取体重20±5g健康昆明小白鼠24只,雌雄不限,随机抽选18只.实验组:用生物骨载体复合骨形态发生蛋白(biological bone carrier and bone morphogenetic protein,BBC-BMP))人工听小骨植入到小鼠左侧大腿后肢肌肉内;对照组:用单纯生物骨载体(biological bone carrier,BBC)人工听小骨植入到小鼠右侧大腿后肢肌肉内,随机分为3组,每组6只,分别在术后第4、12、16周予以处死动物,将植入的人工听小骨及周围包绕组织一起取出,每组标本随机抽取3对置入10%福尔马林溶液中固定,然后用50%甲酸脱钙、梯度酒精脱水,石蜡包埋,连续切片,苏木素-伊红(HE)染色,最后用LEICA-DMLB型光学显微镜观察,以了解人工听小骨周围纤维包膜形成情况以及有无成骨.每组另外31对标本先置入4%戊二醛行前固定过夜,再用10%EDTA脱钙,然后用1%锇酸行后固定,逐级丙酮脱水,Spurr树脂包埋,超薄切片,双重染色,最后用JEOL1010透射电子显微镜观察,以了解生物骨载体复合骨形态发生蛋白人工听小骨内部的超微结构.剩余的6只小鼠随机选3只同上述实验方法在小鼠左、右大腿肌肉内分别植入生物骨载体复合骨形态发生蛋白人工听小骨及单纯的生物骨载体人工听小骨,另外3只做空白对照,只在小鼠左侧大腿后外侧做切口,不植入任何材料,分别在术后第1、3、7天处死动物并在实验部位取组织标本全部固定于10%福尔马林液中,常规脱水、石蜡包埋、切片、HE染色后在光学显微镜下观察以了解人工听小骨植入后早期炎症细胞反应情况.植入前的生物骨载体复合骨形态发生蛋白人工听小骨按上述电镜制片程序同样行电镜观察.
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