阿米福汀对放射性肺损伤保护机理的研究

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目的:观察阿米福汀对正常组织保护作用及调节细胞因子活性的机理,进一步研究放射性肺损伤的发生机制,为阿米福汀的临床应用提供指导性意义。方法:选择18~20g的Balb/c健康雄性小鼠50只,随机分为四组:(1)单纯照射组;(2)阿米福汀+照射组;(3)单纯阿米福汀组;(4)空白对照组。单纯照射组和阿米福汀+照射组各分为三个亚组,每组5~10只。于照射前15分钟腹腔内注射阿米福汀200mg/kg。6MV X线全肺单次照射12Gy。照射后记录呼吸和体重,出现呼吸困难时处死,否则分别于半月、1个月、3个月时处死。取双侧肺组织,左肺用于组织病理学检查、胶原染色及免疫组织化学检查细胞因子TGF-β1、TNF-α在肺里的表达,右肺进行流式细胞仪(Annexin V/PI双染色法)检测细胞凋亡。结果:单纯照射组小鼠从第21天起可见胸背部照射野皮肤出现脱毛现象,且全身毛发光泽逐渐变差,部分小鼠有皮肤湿疹;阿米福汀+照射组小鼠从第23天起胸部照射野皮肤出现脱毛现象,范围较单纯照射组小,毛发有光泽,无皮肤湿疹、糜烂、溃疡。3个月时,单纯照射组小鼠体重增加少于阿米福汀+照射组小鼠,两者比较有明显差异(P<0.05)。胶原纤维染色示单纯照射组1个月时即出现了较多的胶原纤维沉积,正常肺泡壁结构不清楚;3月时,可见大量胶原纤维沉积,肺泡间隔增厚,肺泡腔缩小。阿米福汀+照射组1月时,肺组织中未见明显纤维沉积;3个月时,肺泡壁可见较多炎性渗出物、红细胞和轻度的胶原纤维沉积。免疫组化示,各时间点阿米福汀+照射组和单纯照射组肺组织中TGF-β1和TNF-α的表达均较空白对照组增高(P<0.05),且随着时间延长表达增多;任一时间点两组之间有明显差异(P<0.05)。空白对照组和单纯阿米福汀组比较无表达差异(P>0.05)。流式细胞仪检测显示在放射性肺损伤早期(半个月),阿米福汀+照射组和单纯照射组细胞凋亡率增多,与空白对照组比较有显著差别(P<0.05),两组之间差异显著(P<0.05)。1月、3月均未检测到明显的凋亡。结论:阿米福汀可以保护放射野皮肤,减轻放射性肺损伤的程度,延缓肺纤维化的发生;减少辐射后肺组织中TGF-β1和TNF-α的表达;不影响正常细胞凋亡,能减少放射性肺损伤早期肺组织细胞早期凋亡的发生。TGF-β1和TNF-α参与了放射性肺损伤的发生发展。
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