基于汉式细胞分选技术的中国南海原绿球藻分子生态学研究

来源 :厦门大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengzheng369
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
海洋原绿球藻(Prochlorococcus)是贫营养大洋的优势自养微型生物,可划分为光生理以及16S rRNA基因系统发育显著差异的两个基本生态型,即高光生态型(High light ecotype,HL)和低光生态型(Low light ecotype,LL)。在高光生态型内部有两个不同的亚类,低光生态型有四个亚类,但近年来研究发现还存在着未知的亚类,所以寻找未知亚类是改善原绿球藻定量研究以及加深了解其环境适应机制的必要途径。   流式细胞仪是研究超微型生物的重要工具,本论文与传统的膜过滤采样方法不同,利用流式细胞仪的分选功能获得原绿球藻浓缩样品,并采用简洁的冻融法提取DNA,通过克隆文库以及变性梯度凝胶电泳法(Genaturing Gradinent GelElectrophoresis,DGGE)对中国南海陆架区域近岸A4站位三个水层(2.2 m、50.7m、75.2 m)以及菲律宾沿岸大洋站位Z97三个水层(5.0 m、30.9m、50.9 m)的分选样品进行了原绿球藻分子生态学研究。   克隆文库的系统发育分析表明:所研究海域的高光生态型原绿球藻以HLII为主;低光生态型四个己知亚类中除以纯培养株系MIT9211为代表的LLIII(该论文中的序号)外其余三个已知亚类均有发现,同时还定义了一个新的LL型亚类LLIV。在垂直分布上,与前人研究结果一致,HL型与LL型在水柱中生态位的分离和表层混合层的深度密切相关。近岸与大洋站位之间的差异主要体现在LL型亚类的组成上。比较近岸A4站位2.2 m、75.2 m的膜样与同水层的分选样品所构建的克隆文库,我们发现膜样存在比较明显的非特异性扩增以及较高的聚球藻百分比含量,所以从扩增的准确性上来说,分选样相比膜样有很大的提高。在原绿球藻种群组成方面,两种采样方法的差异体现在两个层面:生态型亚类组成以及各亚类相对丰度(通过克隆文库计算得到),膜样品与分选样品结果的这种差异还需要加大采样量,才能够得到一个较为统一的结果。   本论文同时利用变性梯度凝胶电泳DGGE技术揭示了不同生境下的原绿球藻多样性。对上升流区断面Z96、Z97、Z99以及珠江口断面A1、A4的研究表明,DGGE作为快速检测原绿球藻的种群研究中是行之有效的技术。   综上所述,流式细胞仪的分选样为海洋微型生物多样性的研究提供了一种新的思路,在克服了少量细胞量提取DNA的困难后,所建立起来的文库构建和DGGE的方法可有效地揭示出中国边缘海原绿球藻的多样性。研究中所发现的LL型新亚类对(定量)PCR引物设计提供重要参考,本研究所展示的中国南海原绿球藻种群组成特征,对原绿球藻的环境适应机制以及全球分布有参考意义。
其他文献
桉树是我国的主要人工树种之一,主要产于澳洲大陆,在我国的引种历史已有120余年。桉树人工林的大面积种植为人类带来巨大经济利益的同时,也对区域生态安全产生了重大影响,特
浙江东阳中兴寺砖塔倒塌于1963年,出土文物二百余件(组),其中一级文物多达7件.2018年,东阳市博物馆组织对中兴寺塔出土文物全面整理.出土文物可分为石碑、石函、经卷、小塔、
桥梁的生存环境复杂多样,外部荷载和各种环境侵蚀因素交互作用,使得混凝土材料长期性能不足,严重影响了桥梁结构的服役寿命。现有混凝土耐久性试验方法在试验制度和评价指标方面
中国秦汉时期有无瓷器是一个颇存争议的问题.随着近年来一系列新的田野考古和瓷器科技考古的发现,证明秦至东汉早期的瓷器与秦以前的原始瓷器并无本质区别,把这类瓷器称为“
南朝陵寝制度建设大致有师古与任己两大取向,这于不同方面均有表现.陵墓石刻方面,有明暗两条线索表明其对汉晋文明进行了延袭,同时也以之为基础进行改造.墓葬形制与随葬品方
镁合金具有密度小,理论比容量大,标准电极电位负、电压范围广等优点,因此作为阳极材料被广泛应用于化学电源中。目前,镁基阳极材料还存在极化严重、阳极利用率低、激活时间长等不
过滤机理的研究是目前膜过滤工艺需要研究解决的关键问题之一。膜过滤基本理论模型分别从不同的角度对过滤现象进行了探讨,但由于其理论本身的局限性,均没有从理论上真正体现过
汉代双层木椁墓可分三型,每一型最早都出现于岭南地区,之后有各自流行地域和演变序列:A型流行于西汉时期的成都地区;B型流行于两汉的岭南地区,以广州地区发现最为密集;C型发
随着现代社会的不断发展,建筑行业也逐渐兴起,而电梯在建筑行业中得到了非常广泛的应用,其电梯的安全问题也受到了人们的重点关注,尤其是电梯系统中的制动器电气控制以及安全
工程技术经济分析是为了控制工程造价而使用的技术手段,工程经济管理人员通过比较分析与科学判断选择技术先进且造价合理的工程技术方案.基于此,本文以工程技术经济分析作为