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本研究选取三个小麦品种,甘春20号、甘春24号、中麦175为试验材料,进行茎尖愈伤组织培养及植株再生的研究,探讨了基因型、茎尖生长天数及切取部位、培养基、激素(2,4-D,KT与6-BA)对愈伤组织诱导、分化及植株再生的影响。初步建立了中麦175茎尖愈伤组织培养及植株再生体系,并对其优化。对中麦175茎尖愈伤组织进行遗传转化,探讨了影响农杆菌介导的遗传转化因素,初步建立了农杆菌介导的中麦175茎尖遗传转化体系,成功的将Cl5227基因转入小麦中。研究结果如下:(1)通过对甘春20号,甘春24号,中麦175进行茎尖愈伤组织培养,经分析得出,不同基因型对茎尖愈伤组织诱导及分化有显著的影响;筛选出再生能力好的品种-中麦175,用于下一步的试验;生长3d的茎尖基部第一切段为愈伤组织培养最佳部位;确定了最佳愈伤组织诱导培养基:MS基本成分+2,4-D 2mg/L+CH0.5g/L+Pro 0.5g/L+Gln 0.25g/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L,p H=5.8;2,4-D浓度显著影响茎尖愈伤组织的诱导,随着2,4-D浓度的升高,诱导率呈先升高后降低的趋势,浓度为2mg/L的2,4-D最适宜愈伤的诱导;最佳分化培养基为:MS基本成分+CH0.5g/L+Pro 0.5 g/L+Gln 0.25 g/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+KT 2mg/L+6-BA 2mg/L,pH=5.8。其中,6-BA与K T浓度均达到2mg/L时分化率达到最大。(2)通过对农杆菌介导的中麦175茎尖进行遗传转化,研究发现,侵染时间、菌液浓度、共培养时间对愈伤组织遗传转化有很大影响;愈伤组织的存活率随侵染时间的延长表现出降低的趋势,菌液浓度OD600=0.6,菌液时间为30min时分化率达到最大;茎尖愈伤组织共培养时间对转化的影响中,侵染后的愈伤组织在共培养3d时,分化率达到最大,为共培养适宜天数。500 mg/L头孢霉素(Cef)加入诱导筛选培养基和分化筛选培养基中,可以有效抑制农杆菌生长,且对小麦茎尖愈伤组织的生长影响较小。经诱导筛选21d后的愈伤组织,放置在加入5mg/L卡那霉素的分化筛选培养基上,得到的分化率较高,可有效的进行抗性愈伤的筛选。(3)经培养基抗性筛选后得到2株抗性植株,但经PCR检测,只有1株抗性植株呈阳性。