人TNF-α重组腺病毒转染人肺腺癌细胞的体外生物学特性研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:imanhuaa
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目的:该文在利用COS/TPC同源重组法高效制备人hTNF-α重组腺病毒基础上,对感染人TNF-α重组病毒的人肺腺癌细胞(Anip973)的体外生物学特性进行研究.方法:将携带有人TNF-α基因的重组腺病毒(rAd-hTNF-α)感染人肺腺癌细胞系,通过细胞生长实验、克隆形成实验、流式细胞分析、形态学检查等观察其对Anip973肿瘤细胞的作用;利用PCR和琼脂糖电泳对肺癌中人TNF-α基因进行了检测.结果:rAd-hTNF-α经扩增、纯化后,滴度可达10<10>PFU/ml,当病毒为30MOI时,对Anip973肿瘤细胞除表面结构和超微结构有轻微变化外,其生长能力、克隆形成率及细胞周期等无明显变化.24h细胞培养上清,TNF-α的分泌量为20pg/2×10<5>细胞.结论:腺病毒介导的细胞因子基因hTNF-α转染的Anip973肿瘤细胞未见明显变化,转染hTNF-α基因的肿瘤细胞可明显表达TNF-α.为制备肿瘤疫苗打下基础.
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