目的 考察芍药甘草汤及其联合醋酸泼尼松对ROS介导中性粒细胞NETosis的影响以及对自发性SLE小鼠的治疗作用,探讨芍药甘草汤联合醋酸泼尼松是否通过参与机体氧化应激过程,调控ROS介导的NETosis,进而发挥治疗系统性红斑狼疮的作用。方法(1)以ROS介导的中性粒细胞NETosis为细胞模型,通过免疫荧光法检测中性粒细胞NETs的形成及ROS的生成,考察芍药甘草汤及其联合醋酸泼尼松对中性粒细胞NETs形成和ROS生成的抑制作用。(2)选取8周龄的MRL/lpr小鼠(自发性SLE小鼠),分为模型(MRL/lpr)组、中药(芍药甘草汤)组、西药(醋酸泼尼松)组及中西药(芍药甘草汤联合醋酸泼尼松)组,并设正常对照(C57BL/6J)组,每组6只,连续灌胃8周,每日记录各组小鼠体征情况;ELISA法检测各组小鼠血清中抗ANA抗体及抗dsDNA抗体水平;采用氧化试剂盒检测小鼠血清中SOD及GSH-Px的含量;采用NO试剂盒检测小鼠血清中NO浓度;采用尿蛋白试剂盒测定尿蛋白含量;采用免疫荧光法检测并观察小鼠肾脏组织中NETs(DNA、H3、MPO)的表达量。结果(1)与正常组比较,模型组的中性粒细胞NETs的形成显著升高(P<0.01),细胞内ROS的生成显著升高(P<0.01);与模型组比较,中药组及中西药组的NETs形成显著降低(P<0.01),细胞内ROS的生成显著降低(P<0.01)。(2)芍药甘草汤及其联合醋酸泼尼松均能有效地缓解MRL/lpr小鼠的脾脏、肾脏及淋巴结增生肿大,降低尿蛋白含量、NO浓度以及抗ANA抗体、抗dsDNA抗体水平,减少小鼠肾脏组织中NETs形成,能够改善小鼠的肾功能,减少肾损伤,对SLE发挥治疗作用。(3)芍药甘草汤及其联合醋酸泼尼松均能有效地调节SLE小鼠体内氧化应激反应,与正常对照组相比,模型组小鼠的SOD及GSH-Px含量均有显著性差异(P<0.01);与模型组相比,各治疗组小鼠血清中SOD剂GSH-Px的含量明显增加(P<0.01)。结论 芍药甘草汤及其联合醋酸泼尼松可能通过参与机体氧化应激过程,抑制ROS的生成进而抑制NETs形成,调控以ROS介导中性粒细胞NETosis过程,对SLE发挥良好的治疗作用;芍药甘草汤可以作为一种替代醋酸泼尼松的药物,治疗糖皮质激素抵抗的SLE患者或不愿长期服用激素药物的患者;芍药甘草汤可以在不降低SLE治疗效果的前提下,减少醋酸泼尼松的用量,减少激素对患者的不良反应及副作用。