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目的:本实验以荨麻疹模型大鼠为受试对象,以荨麻疹模型大鼠血清总IgE水平及蓝斑区域皮肤组织形态变化为测试指标,观察针刺“曲池”、“血海”穴对荨麻疹的治疗疗效;以蓝斑区域皮肤组织肥大细胞脱颗粒,组胺、五羟色胺等活性介质的释放以及蓝斑区域皮肤组织P-Lyn/Lyn、P-Syk/Syk的蛋白水平表达差异为测试指标,探讨针刺“曲池”、“血海”穴治疗荨麻疹模型大鼠的作用机制。为今后的临床研究提供理论基础和实验依据。材料与方法:本实验首先通过选用8周龄的雄性SD大鼠10只,体重200-220g,卡介菌疫苗稀释剂1ml腹腔注入和1%卵蛋白生理盐水溶液肌肉注入后腿两侧,每侧0.5ml,12天(IgE血清高峰)后股动脉取血,分离血清并混合,-20℃保存留以备用。其次再选8周龄雄性SD大鼠40只,体重200-220g,采用随机数字表法进行分组,分别为正常对照组,模型对照组,针刺组(曲池,血海)与阳性药物组,每组10只大鼠。针刺组采用毫针(0.25mm×13mm)针刺大鼠“曲池”穴,直刺深度2-4mm;“血海”穴,直刺深度为2-4mm,单纯留针30分钟,每日1次,连续治疗14天。阳性药物对照组给予氯雷他定0.2mg溶于1ml 0.9%氯化钠溶液中灌胃,连续治疗14天。正常对照组和模型对照组则不做任何干预处理。此时再用之前储备的抗卵蛋白血清致大鼠被动皮肤过敏以建立荨麻疹模型。取大鼠腹主动脉血、蓝斑区域皮肤组织。(1)采用酶联免疫吸附法观察大鼠血清总IgE水平的影响;(2)采用HE染色法检测大鼠蓝斑区域皮肤组织形态学;(3)采用甲苯胺蓝染色法观察大鼠蓝斑区域皮肤组织肥大细胞脱颗粒的影响;(4)采用免疫组化法观察大鼠蓝斑区域皮肤组织组胺和五羟色胺的释放以及P-Lyn/Lyn、P-Syk/Syk蛋白表达的影响,并进行统计学分析。结果:1.针刺对大鼠血清总IgE水平的影响结果模型对照组大鼠血清中总IgE的水平显著高于正常对照组,有统计学意义(P<0.05);针刺组和阳性药物组大鼠血清总IgE的含量均低于模型对照组,二者与模型对照组比较均有显著差异(P<0.05);针刺组与阳性药物组相比较,无显著差异,没有统计学意义。2.针刺对大鼠蓝斑区域皮肤组织形态变化的影响结果正常对照组显示:皮肤表皮层薄厚正常,细胞排列紧密有序,结构清晰,未见水肿。模型对照组显示:表皮层明显增厚,有角化不全或者角化过度的现象,真皮肿胀变形,周围小血管炎性浸润严重、基底细胞核多有分裂现象,血管出现水肿扩张。阳性药物组显示:表皮略有增厚,轻微角化不全,真皮轻度水肿,偶见炎性细胞,血管轻度水肿。损害与模型对照组比较显著减轻。针刺组显示:皮肤表皮略有增厚,结构基本完整,细胞间隙略有轻度水肿现象,真皮水肿不明显,偶有少数炎性细胞。与模型对照组相比较,损害显著减轻。3.针刺对大鼠蓝斑区域皮肤组织肥大细胞脱颗粒的影响结果正常对照组大鼠的肥大细胞大部分结构皆完整,且无脱颗粒的现象,细胞质被染较深。模型对照组大鼠的肥大细胞变形肿胀,细胞膜破裂,细胞边缘轮廓不整齐且有颗粒脱出,细胞质被染变浅。针刺组和阳性药物组肥大细胞差异不明显,肥大细胞脱颗粒现象变少,细胞质被染颜色较正常对照组浅,但比模型对照组深。4.针刺对大鼠蓝斑区域皮肤组织组胺、五羟色胺释放的影响结果与正常对照组相比较,其他各组大鼠组胺、五羟色胺表达均有显著增加;与模型对照组相比较,针刺组和阳性药物组组胺、五羟色胺表达均有减弱,且有显著差异(P<0.05);针刺组和阳性药物组相比较,无显著差异。5.针刺对大鼠蓝斑区域皮肤组织P-Lyn/Lyn、P-Syk/Syk蛋白表达的影响结果与正常对照组相比较,其他各组大鼠P-Lyn、P-Syk的蛋白表达均有显著增加;与模型对照组相比较,针刺组和阳性药物组P-Lyn、P-Syk的蛋白表达均有减弱,且有显著差异(P<0.05);针刺组和阳性药物组相比较,无显著差异。结论:1.针刺可以抑制大鼠总血清IgE水平,减轻大鼠蓝斑区域皮肤组织的病理变化,表明针刺可抑制I型超敏反应,同时亦证明了针灸对荨麻疹的治疗作用。2.针刺可以降低蓝斑区域皮肤组织肥大细胞脱颗粒,从而抑制其炎症介质的释放,可能是针刺治疗荨麻疹病症的机制之一。3.针刺可以减少蓝斑区域皮肤组织组胺和五羟色胺等活性介质的释放,降低炎症反应,可能是通过抑制肥大细胞脱颗粒实现的。4.针刺可以降低蓝斑区域皮肤组织P-Lyn、P-Syk的蛋白表达水平,通过抑制Lyn、Syk的磷酸化,从而阻止信号向下游通路传导,抑制肥大细胞脱颗粒,抑制其释放炎性介质,进而抑制I型超敏反应的发生,达到治疗荨麻疹的目的。这可能是针刺治疗荨麻疹发病机制的深入探讨。