5-氮杂-2’-脱氧胞苷对胃肠道间质瘤细胞GIST882生物学行为的影响

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目的:研究甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人胃肠道间质瘤细胞GIST882生物学行为的影响,观察5-Aza-CdR与伊马替尼(Imatinib,STI57,Glivec,格列卫)联合使用的相互作用,探讨其临床治疗胃肠道间质瘤的可能性。方法:分别使用浓度为1ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL及1000 ng/mL的5-Aza-CdR及0.1μM、1μM、10μM、100μM的格列卫处理人胃肠道间质瘤细胞GIST882。(1)MTT、软琼脂集落形成实验及平板克隆形成实验观察GIST882细胞的增殖,5-Aza-CdR与格列卫的相互作用采用Weeb系数判定。(2)划痕愈合及Transwell小室侵袭实验观察细胞体外运动迁徙及侵袭能力的改变;(3)流式细胞术检测GIST882细胞周期及凋亡比例的变化;(4)免疫细胞化学法检测5-Aza-CdR作用前后Caspase9、Bcl-2蛋白表达的变化。结果:(1)5-Aza-CdR呈浓度和时间依赖性抑制GIST882细胞增殖,并减弱GIST882细胞的迁移及侵袭能力(P<0.05),与格列卫联合作用时以上作用效果更为明显(P<0.05);(2)流式细胞术检测发现经5-Aza-CdR处理的GIST882细胞,G0/G1期比例增加,凋亡比例增高(P<0.05);联合用药组凋亡比例较单独用药差异显著(P<0.05),但格列卫组及联合用药组对细胞周期的改变不明显(P>0.05)。(3)经5-Aza-CdR作用后,凋亡相关蛋白Caspase9的表达增加,Bcl-2的表达降低(P<0.05)。结论:5-Aza-CdR能抑制胃肠道间质瘤GIST882细胞增殖,诱导其凋亡,具有一定的抗肿瘤活性,并且与格列卫联用时具有协同作用
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