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目的:对恶性肿瘤进行靶向治疗是近10多年来研究的热点之一,靶向治疗可以克服常规化疗的许多不足,且对化疗耐药的肿瘤亦是一种治疗方法。白介素-3受体由α、β链组成,其α链基因定位于Xp22.3、Yp13.3。近年来,许多学者对白介素-3受体α(IL-3Rα)进行了研究。国外学者经过免疫细胞化学、流式细胞术等方法对部分白血病患者骨髓白介素-3受体α单个核细胞研究发现:白介素-3受体α是未分化白血病干细胞的特异性标志,其在白血病干细胞高度表达,而在正常干细胞白介素-3受体α不表达。因此以白介素-3受体α为靶点有可能成为选择性清除白血病细胞的有前途的治疗策略。国外学者虽然在白介素-3受体α与白血病关系做了一些研究,但未发现有动态观测的报道,经过化疗后白介素-3受体α的表达是否发生变化,国内未见有相关报道。本研究的目的在于验测白介素-3受体α是否为白血病细胞的表面标志,其表达水平与白血病亚型是否相关、白介素-3受体α基因的表达水平与白血病治疗疗效及预后有无相关性。
方法:本研究的研究对象包括80例急性白血病(acuteleukemia,AL)患者(包括56例初治急性白血病患者、9例复发患者和15例缓解患者),12例慢性粒细胞白血病慢性期(chronicmyelocyticleukemia-chronicphase,CML-CP)患者,5例慢性粒细胞白血病急变期(chronicmyelocyticleukemia-blasticphase,CML-BP)患者,15名非肿瘤病人作为对照组(normalcontrol,NC),KG-1α细胞株为阳性对照。将其分为初治急性白血病组、缓解组、复发组、慢性粒细胞白血病组和对照组。应用半定量逆转录-聚合酶链反应(semi-quantityreversetanscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测各组白介素-3受体αmRNA水平。
结果:1采用RT-PCR分析IL-3RαmRNA的表达水平。1.1IL-3RαmRNA在56例初治AL患者中43例表达阳性,基因平均相对表达水平(IL-3Rα/β-actin)为0.685,阳性率为76.8%,表达水平明显高于对照组(15例对照者中3例表达阳性,阳性率为20.0%,平均水平为0.137),结果具有显著性差异,P<0.05;急性髓细胞白血病(AML)组(表达率80.0%,平均表达水平0.732)与急性淋巴细胞白血病(ALL)组(表达率63.6%,平均表达水平0.635)两组均高于对照组(P均<0.05)。AML、ALL两组之间表达水平无统计学差异(P>0.05)。复发组(表达率100%,平均表达水平0.983)高于对照组(P<0.05),且高于初治AL组(0.685),有统计学差异(P<0.05)。IL-3RαmRNA在15例缓解组中有4例表达阳性,平均表达水平为0.280,阳性率为26.7%,表达水平与对照组比较无统计学差异(P>0.05),但表达低于初治AL组(0.685),且差别有显著性(P<0.05)。
1.2IL-3RαmRNA在12例慢性粒细胞白血病慢性期患者表达率41.7%(5/12),平均表达水平0.359;高于对照组,但无统计学意义(P>0.05)。在急变期5例,表达率60%(3/5),出现IL-3Rα的高表达(0.653),且与对照组存在统计学差异(P<0.05);急变期与慢性期比较,存在统计学差异(P<0.05)。
1.3IL-3RαmRNA表达水平在FAB分型各亚型中的表达存在差别,但无统计学意义(P>0.05),此结果可能与样本例数相关。
1.4IL-3RαmRNA在KG-1α白血病细胞株中明显高表达。2在56例AL患者中42例可进行疗效评估,8例IL-3RαmRNA表达阴性者8例获完全缓解(CR),缓解率100%;34例IL-3RαmRNA阳性患者17例获完全缓解,缓解率50.0%。在34例初治IL-3RαmRNA阳性AL患者中,13例IL-3Rα高表达患者中1例达完全缓解(7.69%),21例低表达患者16例缓解(76.19%),IL-3Rα低表达患者的缓解率明显高于高表达患者,两者比较差别有显著性(P<0.05)。在随访的42例AL中,7例复发的AL患者,仅有1例用药后达到CR,其IL-3RαmRNA表达均阳性,余6例均未达到CR。
结论:1初治急性白血病患者异常高表达IL-3RαmRNA。
2在慢性粒细胞白血病慢性期患者,IL-3RαmRN表达水平高于对照,但差别无统计学意义。在急变期,出现IL-3RαmRNA的明显高表达。
3IL-3RαmRNA高表达的患者缓解率低,表明与白血病的发病及疗效预后有关。可用来作为判断疗效预后的又一新指标。
4IL-3RαmRNA在KG-1α白血病细胞株中明显高表达。