解磷巨大芽孢杆菌的筛选及产业化应用研究

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解磷巨大芽孢杆菌作为农用微生物菌剂常用的菌株,具有解磷、促生、生防、等多种功能。因此,选育优良的解磷能力强的菌株也尤为重要,本论文从6株购买的解磷巨大芽孢菌筛选出具有明确功能的菌株,并且对其生长条件、培养基、产业化生产工艺条件进行了研究。6株菌都能够分解难溶性无机磷Ca3(PO4)2。据不同菌培养液上清液的有效磷含量,筛选出J1、J2 J3三株巨大芽孢菌在土壤中均具有解磷效果,其中J3的解磷效果最好,经过30天的培养,土壤中有效磷含量由20.68mg/L升至35.63mg/L。而非解磷LA菌由20.68升至21.52mg/L。解磷效果明显优于非解磷菌。初步确定J3解磷巨大芽孢菌为下一步盆栽试验用菌。添加4000万/盆J3解磷巨大芽孢菌的植株45天生长期结束统计平均干重,增产达到19.6%,增产幅度最大,确定其为解磷菌J3的适宜添加量。通过田间小区试验结果方差分析看出:应用农用微生物菌剂解磷菌J3增产效果明显,处理1比处理3增产玉米47.3千克/亩,增产率8.08%,差异极显著。处理2比处理3增产玉米1.3千克/亩,增产率0.23%,差异不显著。通过单因素实验,确定了J3解磷巨大芽孢菌250ml三角瓶最佳装量为25ml。其最佳的生长ph为7.0,最适生长温度37℃。确定糖蜜2作为碳源,玉米浆干粉作为氮源,无机盐是CaCL2。采用正交实验优化培养基配方,即最优配方为玉米浆干粉2.0%、糖蜜5.0%、CaCL20.06%、K2HPO40.3%。0.01%或0.1%的接种量就可以满足生产需要。最适培养基在10L小罐上发酵,当通风量达到1.5时,转速达到350r/min到时芽孢数最大。根据其生长曲线初步判定放罐时间在24-28h间,取样时间在12-16h、20-28h镜检在芽孢率95%以上放罐。在1000L和5000L罐上其中转速达到200 r/min时,通风量达到1.5芽孢数达到最大。基本确定为出液量到达1200ml离心收率高。确定高速混合时间在10min,确定最佳的干燥温度在45℃,显示产品最佳的存放温度30℃以下。
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