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鸡球虫病(Coccidiosis)是由数种艾美耳球虫在鸡肠道黏膜细胞内寄生引起的一种寄生性原虫病,在集约化养殖场中,球虫病的发病率最高,严重危害养鸡业的发展,其中尤以柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的致病性最强。并且由于抗药性、药物残留等问题的出现以及抗生素的限制应用或禁用,也给球虫病的防治带来了挑战。故积极寻找源于天然的替代药物降低球虫的耐药性及药物残留问题迫在眉睫。近年来的研究表明,抗疟特效药青蒿素(Artemisinin, ART)可通过抑制球虫卵囊壁的形成而减少卵囊排放量,同时能够降低卵囊的孢子化率显示出一定的抗球虫效果。故本试验以柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella, E. tenella)感染和青蒿素药物治疗为模型,评估青蒿素类药物的抗球虫疗效,再以柔嫩艾美耳球虫感染的盲肠组织蛋白和子孢子为研究对象,对青蒿素类药物抗球虫机理进行初步探讨,为其抗球虫机理的研究提供参考。具体研究结果如下:1.为探讨青蒿素类药物对鸡E. tenella的防治效果。试验分为空白对照组(Control)、球虫组(E. tenella infection, EI)、青蒿素组(Artemisinin, ART)、黄花蒿组(Leaves of artemisia annua, LAA),于接种球虫卵囊后,通过相对增重率、存活率、盲肠病变计分、卵囊值、血便计分、抗球虫指数(Anticoccidial Index, ACI)等数据,判断青蒿素类药物对鸡球虫病的防治效果。结果表明,与EI组相比,ART和LAA可显著降低感染鸡的血便计分和盲肠病变计分(P<0.05),减轻鸡盲肠组织的病变程度,两个用药组的ACI分别分别为111.6和129。试验结果表明ART和LAA对鸡E. tenella有一定的效果,但要增强青蒿素类药物的抗球虫效果,还需在剂型、给药方式和联合用药方面做进一步研究。2.为研究青蒿素类药物对鸡E. tenella球虫感染的盲肠组织凋亡蛋白的影响。本研究将试验鸡分为Control、 EI、ART和LAA四组,分别于球虫感染的第60、120、192 h,采集各组试验鸡盲肠组织,检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况,以及192 h时NF-κB和IL-17 mRNA的表达情况。结果显示,在球虫感染的第60h,抑凋亡蛋白Bcl-2的表达量上升;在球虫感染的第120和192 h,则促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达量上升。而ART及LAA使用过程中则会下调Bcl-2的表达,上调Bax、Caspase-3的表达(P<0.01)。同时ART和LAA也显著下调NF-ΚB和IL-17 mRNA的表达(P<0.01)。3.为研究青蒿琥酯(Artesunate, ARS)对柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵DF-1细胞的影响。本试验利用ARS分别处理子孢子和DF-1细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡、子孢子线粒体膜电位、子孢子入侵率。结果显示,ARS对细胞凋亡率影响无显著差异;ARS直接处理子孢子2 h,使其线粒体膜电位下降33.97±8.40%,入侵率下降4.13±3.97%。ARS直接处理细胞2h和12h后,再加入子孢子,则其入侵率分别下降7.23±2.74%和53.67±0.74%。细胞和子孢子混合后用ARS处理12 h,入侵率下降56.30±1.81%。若在ARS处理的同时加入凋亡抑制剂米酵菌酸,可使子孢子的入侵率提高9.70±0.60%(P<0.01)。