论文部分内容阅读
目的:采用LC-MS/MS法测定南五味子中三种木脂素的含量,并进行体内外代谢及药代动力学研究,为南五味子的临床合理用药以及从代谢产物中发现新药提供实验依据。方法:1.采用液质联用技术（LC-MS/MS）测定不同产地南五味子中三种木脂素成分含量。2、利用质谱多反应监测技术（MRM）对大鼠、人肝微粒体温孵体系中的五味子甲素进行酶代动力学研究。3.利用选择离子监测模式（SIM）对五味子甲素在肝微粒体温孵液及大鼠给药血浆和尿液中的原药及其代谢产物进行测定。4.进行南五味子浸膏给药后的五味子甲素、五味子醇甲的药代动力学研究结果:1、不同产地南五味子中三种木脂素成分的测定12个产地南五味子中的五味子甲素含量均值为4050.58±360.90μg·g-1、五味子醇甲77.00±15.33μg·g-1、五味子乙素含量为71.34±56.75μg·g-1,且不同产地上述三种成分的含量差异显著。2、五味子甲素在大鼠及人肝微粒体中的酶代谢动力学研究对肝微粒体温孵体系进行了优化,不同浓度的五味子甲素在大鼠及人肝微粒体中的t1/2均小于0.8 min;其内在清除率(CLint)为19.9144.03mL*min-1*g-1pro之间,说明其代谢速率高。3、五味子甲素体内外代谢产物分析在大鼠、人肝微粒体中都检测到11种代谢产物,所有代谢产物的保留时间都低于原药,说明代谢产物极性较大,其中M6、M13均有3个同分异构体;M12、M9、M5、M2有2个同分异构体,12种代谢产物中有6个峰面积较大;在大鼠血浆、尿液中只检测到4种代谢产物,为这6个峰面积较大的代谢产物中的4种。其中M11的峰面积最大,后经鉴定为五味子醇甲。4、液质联用法用于南五味子主要有效成分药代动力学研究建立测定血药浓度的LC-MS/MS法,测定方法符合规范要求。五味子甲素吸收快,0.5-1h即达到高峰值,在不同大鼠之间浓度差异大,所有大鼠都有双峰现象,其AUC（0-t）为259.04μg/L*h;t1/2为6.54h。其半衰期比肝微粒体的半衰期长,可能与肝肠循环有关。南五味子浸膏中五味子醇甲含量极低,但浸膏给药后,其药时曲线与五味子甲素高度同步,同样有双峰现象,其AUC（0-t）更大,为316.86μg/L*h,为五味子甲素的1.22倍;说明五味子甲素在体内被迅速地代谢为五味子醇甲。结论:1.五味子甲素是南五味子中含量最高的组分,但其半衰期极短,成药性较差。2.五味子甲素在大鼠体内有11种代谢产物,其中部分代谢产物有2-3个同分异构体;大鼠肝微粒体中6个代谢产物峰面积较大,只有其中峰面积-时间曲线平稳或上升的4个代谢产物在给药大鼠血浆中能测到。因此,肝微粒体体外代谢研究能为从代谢产物中寻找具有药理活性的代谢产物提供信息。3.南五味子浸膏给药,五味子甲素的半衰期长,可能是由于肝肠循环造成的;五味子甲素被代谢为五味子醇甲,且五味子醇甲的AUC比原药更大。