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实验目的:本课题旨在研究充血性心力衰竭中,用PDTC(核转录因子NF-κB的拮抗剂)干预处理后,在中枢脑组织中炎性细胞因子TNF-a表达情况是否受到影响,以探讨抑制中枢核转录因子NF-κB活性是否可以减少中枢肿瘤坏死因子TNF-a生成,从而阻断中枢途径对心衰的影响,为心衰的研究治疗探索新的思路与途径。实验方法:山西医科大学实验动物中心雄性SD大鼠200±25g共48只,随机分为两大组(每组24只):心衰组与假手术组。心衰组经左侧开胸行冠状动脉左前降支结扎术,诱导心衰的发生,制备心衰动物模型。假手术组不结扎冠状动脉。心衰组与假手术组再各自随机分为两小组(每小组12只)即PTDC(吡咯烷二硫甲酸盐)干预组与对照组。PTDC干预组采用口服水中给药(150mg/kg/day),对照组给自来水。四周后各组大鼠再次称重、麻醉。各组随机选取6只经右颈总动脉插管至左心室,用导管法行血流动力学检测,多导生理记录仪记录平均动脉压(MAP)、左室舒张末压(LVEDP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)。检测结束处死大鼠,立即取出心脏、肺,用冷肝素生理盐水冲洗,滤纸吸干水分,称取右心室(包括室间隔)及肺湿重,并分别与体重相除,计算其相对重量。其余6只经左心室插管做全身灌注生理盐水+4%多聚甲醛各500 ml,灌注完毕立即取脑组织放入4%多聚甲醛中固定24h,石蜡切片进行免疫组化染色。结果:1、免疫组化:假手术组大鼠下丘脑室旁核内TNF-a因子蛋白表达阴性(-),心力衰竭大鼠室旁核内TNF-a呈强阳性表达(+++),蛋白阳性呈棕黄色颗粒,散在性分布于室旁核神经元及神经胶质细胞胞浆内,心衰经PDTC干预后大鼠下丘脑室旁核内TNF-a呈中等阳性表达(++),神经元、神经胶质细胞胞浆内棕黄色颗粒较少。2、血液动力学检测:①心率除心衰对照组与假手术干预组之间差异无统计学意义(P＞0.05),其它各组之间差异均有统计学意义(P＜0.05);②平均动脉压(MAP)、左室内压最大上升速率(LV+dp/dtmax)与左室内压最大下降速率(LV-dp/dtmax)在假手术两组之间差异无统计学意义(P＞0.05),其余各组之间差异均有统计学意义(P＜0.05);与假手术组比较,心衰组MAP、LV+dp/dtmax、LV-dp/dtmax等值均有所下降,有统计学意义(P＜0.05),而PDTC干预后其值均有一定程度提高。③与假手术组比较,心衰组大鼠左心室终末舒张压(LVEDP)值显著升高,有统计学意义(P＜0.05),而PDTC组与心衰对照组比较,LVEDP值明显降低,有统计学意义(P＜0.05),但仍未达假手术组水平。3、右心室及肺湿重与体重变化:①假手术两组之间右室相对重量(RVRW)的差异无统计学意义(P＞0.05),其余各组之间差异均有统计学意义(P＜0.05)。心衰对照组与PDTC干预组RVRW值均大于假手术组,有统计学意义(P＜0.05),心衰干预组较心衰对照组RVRW值有所降低但仍高于假手术组水平,有统计学意义(P＜0.05)。②肺与体重相对重量之比假手术两组之间差异无统计学意义(P＞0.05),心衰对照组与心衰干预组值均大于假手术组,PDTC干预治疗后显著降低了CHF大鼠的肺与体重比指数,但未恢复到假手术组水平,有统计学意义(P＜0.05)。4、Western blot测定:假手术两组之间差异无统计学意义(P＞0.05);与假手术组相比,心衰组TNF-a表达明显增加,其差异有统计学意义(P＜0.05),PDTC干预组TNF-a蛋白表达较心衰对照组有所减弱,但未恢复到假手术组水平,有统计学意义(P＜0.05)。结论:用吡咯烷二硫甲酸盐PDTC的干预,通过抑制核因子NF-KB的活性,可以调控中枢下丘脑室旁核脑内TNF-a水平降低,从而减轻了心力衰竭的程度。实验二充血性心力衰竭时，PDTC对心、肾组织中TNF-a的水平变化影nlaj及其意义的研究实验目的本课题旨在研究充血性心力衰竭中，用PDTC(核转录因子NF-K B的拮抗剂)干预处理后，在心、肾组织中TNF-a因子表达情况是否受到影响，为延缓心衰进程探索新的思路与途径。实验方法山西医科大学实验动物中心雄性SD大鼠200±25g共18只，随机分为三组(每组6只)：假手术组、心衰组与心衰治疗组。心衰组与心衰治疗组经左侧开胸行冠状动脉左前降支结扎术，诱导心衰的发生，制备心衰动物模型。假手术组除不结扎冠状动脉其余手术操作与心衰组相同。心衰治疗组采用口服水中给PTDC(150mg/kg/day)，心衰组与假手术组给自来水。四周后各组大鼠再次称重、麻醉，经左心室插管做全身灌注生理盐水+4％多聚甲醛各500 ml，灌注完毕立即取心、肾组织放入4％多聚甲醛中固定24h，石蜡切片进行免疫组化染色。结果①心脏：假手术组表达(-)，心衰组TNF-a蛋白表达为强阳性(+++)，在心肌纵断面清晰可见心肌横纹、心肌闰盘等结构分布有大量的弥漫性的棕黄色颗粒。心衰治疗组TNF-a蛋白表达为弱阳性(+)，心肌细胞胞质中棕黄色颗粒明显减少、染色变浅。②肾脏：假手术组表达(-)，心衰组TNF-a蛋白表达为强阳性(+++)，在肾实质内表现为各种肾小管管壁细胞胞质分布有弥漫性棕黄色颗粒。心衰治疗组TNF-a蛋白表达为弱阳性(+)，肾小管管壁细胞胞质棕黄色颗粒明显减少。结论假手术组TNF-a蛋白表达阴性，心衰组表达强阳性，心衰治疗组表达弱阳性，说明治疗有效。充血性心力衰竭疾病中，用吡咯烷二硫甲酸盐PDTC的干预，抑制了核因子NF-κB的活性后，在心、肾组织TNF-a水平得到降低，有利于改善心力衰竭疾病。