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现代牡月培育中,牡丹工厂化生产存在一定困难,主要问题是生长周期长、扩繁系数低、不易选育新品种,造成目前传统繁殖方式已无法满足牡丹的应用需求。组织培养技术可以克服传统繁殖方式的不足,可以在较短时间内大量扩繁优良品种,并且便于利用遗传转化等技术改良原有品种和培育新品种。本文以四川彭州天彭牡月品种中筛选出的优良品种‘红丹兰’为材料,分别选择其叶柄、顶芽和花粉作为外植体,探讨了各外植体不同消毒方法对污染影响和各外植体对褐化的响应及防止。另外以芽为外植体探讨了不同生长调节物质在芽的萌发、增殖以及诱导生根等过程中的作用。试验结果如下：1.顶芽初步消毒处理方式和时间对‘红丹兰’污染情况有一定影响,结果表明：顶芽使用800-1000倍多菌灵浸泡洗刷处理后污染程度比洗衣粉效果低27.3%并且10d内褐化延缓效果不明显,褐变死亡率较低；HgCl2处理,顶芽8min效果最好,叶柄6min效果较好。2.顶芽离体培养的褐化与污染防止上,褐化程度与6-BA和NAA用量比值的上升与呈现正相关,并且在3mg/L6-BA+1mg/L NAA时污染褐化最严重,1mg/L6-BA和NAA时褐化情况最低。激素用量与褐化结果极显著关系,而8min与10minHgCl2处理时间仅对高浓度激素下褐化结果影响显著。3.叶柄离体培养的褐化防止研究中6-BA, NAA和PVP用量均对褐化有一定的影响,其中激素用量比500mg/L PVP对褐化影响明显,NAA:6-BA在1：1.5(NAA2mg/L/6-BA3mg/L)时褐化最严重,1:3(NAA1mg/L/6-BA3mg/L)时最轻,且NAA用量上升对褐化加重有明显影响。其中500mg/L PVP对褐化延缓不是特别明显；1g/LPVP可以减轻褐化情况,但是仍不能延缓褐化出现时间。因此激素与添加剂最佳设置为：MS+2mg/L6-BA+1mg/L NAA+1g/L PVP。最后,在转瓶对叶柄褐化死亡研究中3d转瓶后第8d褐化和死亡率最低,7d内不转死亡率最高。4.花粉生活力证明‘红丹兰’花粉有较强遗传受精能力,做为愈伤培养的外植体是可行的；其愈伤培养的褐化研究中MS+4%糖+1g/L酸水解酪蛋白+1mg/LKT+1mg/LIAA对花粉褐化情况的减轻具有一定效果,因此碳源和水解酪蛋白用量的增加对花粉愈伤培养中花粉细胞褐化防止效果具有有益影响。但是此方法如何让花粉愈伤组织分化还待研究。5.顶芽的离体培养中,Ag+对‘红丹兰’抵抗褐化无明显效果,但在诱导生长有一定效果；诱导生长中,1.25mg/L6-BA对持续诱导生长效果明显,并且NAA用量越高诱导速度越快,用量增加到1mg/L后即可出现大量愈伤组织。在一定范围内,当两激素用量相同时褐化最严重,因此,当NAA为1mg/L时,选用1mg/L<6-BA<2mg/L。综上,最佳诱导生长及愈伤组织培养基为MS+1.25mg/L6-BA+1mg/L NAA+2mg/L AgNO3;增殖培养中MS+1.25mg/L6-BA+1m/L NAA效果最好；另外,生根培养中2mg/L IBA能有效促进根原基的形成。