论文部分内容阅读
金银花是一种“药食同源”的绿色天然植物，具有抗病原微生物、解热、抗炎、保肝、止血、抗氧化和免疫调节等作用，是一种重要的可再生资源。多酚类物质（主要是氯原酸和黄酮类）是金银花的主要有效成分。本实验课题是对其有效活性成分进行提取、分离、鉴定和活性等方面的研究，主要通过抗氧化实验和抑菌实验分析金银花提取物和绿原酸之间的活性差异，揭示其抗氧化作用与绿原酸含量的内在关系及其抗氧化作用的物质基础，为进行金银花类保健品和药品的开发提供技术依据。本文以浙江温州产金银花为研究对象，利用现代分离手段和新技术对金银花提取物进行了研究，主要结果如下：1金银花的化学组成研究以浙江瑞安地区金银花为研究对象，对其基本成分作了比较系统的分析，测定了水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分、粗纤维、鞣质、总黄酮、挥发油和矿物元素等的含量分别是1.00％、13.36％、4.40％、6.31％、19.80％、5.64％、3.62％、0.60％。2金银花活性物质的提取以金银花粉末为原料，比较了乙醇提取、超声波提取、酶法提取、水提法四种方法的差别，然后采用乙醇法提取，通过单因素实验，旋转正交实验确定最佳提取条件，研究结果表明，在乙醇浓度65％、提取温度65℃、提取时间为1.75h时，金银花中绿原酸类物质的提取量达129.70mg／g。3金银花提取物的鉴定通过大孔树脂AB-8进行纯化，用50％乙醇进行洗脱，得到了较纯的绿原酸类物质。采用紫外分光光度计、傅立叶红外对其结构进行初步鉴定，采用HPLC并用梯度洗脱对其进行鉴定。然后用Hypercil ODS色谱柱，以甲醇-1％醋酸作为流动相进行梯度洗脱，用反相高效液相色谱法鉴定了金银花中的绿原酸类物质。4金银花提取物和绿原酸的抗氧化活性研究用K3[Fe（CN）6]测定了它们的还原力，采用脱氧核糖-铁体系、超氧阴离子自由基体系、二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）体系进行抗氧化活性的研究，并同Vc进行了比较。结果表明：金银花提取物的抗氧化活性与绿原酸含量密切相关，具有较强的还原力，并对这几种自由基均有不同程度的清除作用，其中清除羟基自由基能力比Vc好，浓度1mg／mL时可以达到53.18％；清除超氧阴离子的能力很好，略低于Vc，浓度0.2mg／mL时清除率大于90％；清除DPPH·的能力高于Vc，浓度0.2mg／mL时清除率大于90％。5金银花提取物绿原酸的抑菌特性研究分别以生理盐水为阴性对照、庆大霉素为阳性对照，以金银花提取物和绿原酸的系列浓度设置试验组；测定对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、啤酒酵母、和黑曲霉的抑菌作用，并选定金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作抑菌试验；滤纸片法测定金银花提取物和绿原酸对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别是0.5mg／mL、1mg／mL、3.125μg／mL、3.125μg／mL，并分析了其相关性；活菌记数法测定金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长曲线和抑制生长曲线。结果表明金银花提取物和绿原酸对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都有着显著的抑制作用。