环糊精糖基转移酶菌株发酵工艺优化及酶固定化的研究

来源 :西北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lihaolong2005
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本文通过化学和物理诱变,获得一株稳定高产环糊精糖基转移酶菌株在此基础上优化了该菌株的摇瓶产酶条件及5L发酵罐发酵条件,并研究了菌株HAUV-4所产的转移酶的固定化条件及固定化酶与游离酶的酶学性质。结果分述如下: 1.以实验室保藏的一株嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alcalophilus)IS为研究对象,其产CGTase酶活力为1764.7U/mL,做为后续诱变的出发菌株。 2.经正交实验,确定菌株HAUV-4产酶的最佳培养基配方。 3.在5L罐发酵罐中,研究了菌株HAUV-4的发酵规律并对发酵条件进行了优化。 4.将经过(NH4)2804初步分离的CGTase酶液采用海藻酸钠固定的最适条件为:海藻酸钠浓度7%(终浓度约为2.3%);CaCl2浓度3%;海藻酸钠体积与酶液量比例1:2;固定化时间2.5h。 5.固定化酶与游离酶相比最适温度都在60"C左右,在pH5.0和pH9.0,固定化酶与游离酶的酶活力均出现两个高峰。但酶经固定后热稳定性比游离酶所提高,pH稳定性范围也明显扩大。
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