二化螟及其寄生蜂二化螟盘绒茧蜂鱼尼丁受体的基因克隆与序列分析

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本文主要克隆并得到了二化螟及其寄生蜂二化螟盘绒茧蜂的鱼尼丁受体的基因全序列,预测了主要的结构区域,并通过蛋白的氨基酸序列对比分析推测了导致二酰胺类杀虫剂对二化螟高毒而对二化螟盘绒茧蜂毒性极低的可能原因。主要内容如下:1二化螟鱼尼丁受体的基因克隆与序列分析二化螟鱼尼丁受体(Chilo suppressalis ryanodine receptor, CsRyR)基因CsRyRcDNA的ORF编码5113个氨基酸,分子量约为578.5kDa,没有信号肽,具有很长的亲水性的N端。C端具有六个疏水性跨膜域(TM1:4460-4482; TM2:4641-4663; TM3:4723-4745; TM4:4865-4887; TM5:4913-4935; TM6:4993-5012)。CsRyR与稻纵卷叶螟鱼尼丁受体(Cnaphalocrocis medinalis ryanodine receptor, CmRyR)具有最高的相似性,达89%。2二化螟盘绒茧蜂鱼尼丁受体的基因克隆与序列分析二化螟盘绒茧蜂鱼尼丁受体(Cotesia chilonis ryanodine receptor, CcRyR)的基因CcRyR cDNA的ORF编码5121个氨基酸,分子量约为580.0kDa,CcRyR没有信号肽,具有很长的亲水性的N端。在C端,包含六个疏水性跨膜结构域(transmembrane domain)(TM1:4445-4467; TM2:4632-4654; TM3:4726-4748; TM4:4869-4891; TM5:4917-4939; TM6:4997-5016)。CcRyR与印度跳蚁鱼尼丁受体(Harpegnathos saltator ryanodine receptor, HsRyR)、熊蜂鱼尼丁受体(Bombus terrestris ryanodine receptor, BtRyR)和意大利蜜蜂鱼尼丁受体(Apis mellifera ryanodine receptor, AmRyR)具有84%相似性,而与CsRyR、CmRyR则都只有75%的相似性。3通过重点比较CcRyR和CsRyR的氨基酸序列,同样发现了鳞翅目特异的几个氨基酸残基(CsRyR中对应的是N4963,N4965,N4976,L4991,L5022,N5054和T5105),另外还发现了相比CsRyR, CcRyR的TM2和TM3之间有一段增加的氨基酸(4700-4708)。这些可能是导致二酰胺类杀虫剂对二化螟高毒而对二化螟盘绒茧蜂毒性极低可能原因。
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