目的：(1)建立灵长类—爪哇猴由环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors, EEDs)引致的性早熟疾病模型。(2)在爪哇猴性早熟模型上验证滋阴泻火中药对EEDs拟雌激素活性的拮抗作用,以更准确地模拟人类的疾病过程及药物的治疗作用。(3)采用分子生物学实验方法,研究并阐明中药拮抗EEDs拟雌激素活性的作用机制,为开发具有自主知识产权的有效拮抗EEDs生殖毒性的中药制剂提供更为恰当的理论依据。方法：(1)预实验：以青春前期雌性爪哇猴为实验对象,选取具有代表性的EEDs—壬基酚(4-nonylphenol,4-NP)及双酚A (bisphenol A,BPA)作为染毒物质,复制爪哇猴性早熟的疾病模型。爪哇猴分为两个月龄组,每个年龄组分高剂量染毒组、低剂量染毒组及对照组。每日空腹给药。以阴道脱落细胞成熟指数、子宫容积、子宫湿重、脏器系数、子宫内膜厚度、子宫肌层厚度、子宫内膜上皮细胞高度、子宫腺上皮高度为指标。结果采用单因素方差分析,观察EEDs的拟雌激素作用。确定爪哇猴性早熟疾病模型建立的最佳月龄、最佳染毒剂量及最佳染毒时间。(2)以最佳月龄的青春前期雌性爪哇猴为实验对象,以最佳剂量的壬基酚(nonylphenol,4-NP)及双酚A (bisphenol A,BPA)复制联合染毒的性早熟疾病模型。爪哇猴随机分为染毒组,治疗组及对照组,每日空腹给药。染毒组喂饲4-NP及BPA,治疗组喂饲4-NP、BPA及中药,对照组喂饲溶剂玉米油。以雌激素水平、阴道脱落细胞成熟指数、子宫湿重、脏器系数、子宫内膜厚度、子宫肌层厚度、子宫内膜上皮细胞高度、子宫腺上皮高度为指标,结果采用单因素方差分析,验证中药对EEDs拟雌激素活性的拮抗作用。(3)采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)及免疫印迹方法(Western Blotting)方法,检测雌激素受体α (estrogen receptor α, ERa)、雌激素受体β (estrogen receptor β, ERβ)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)、胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor-1receptor, IGF-1R)、胆固醇侧链裂解酶(cytochrome P450,family ll,subfamily A,polypeptide1, CYP11A1)、芳香化酶(cytochrome P450,family19,subfamily A,polypeptide1, CYP19A1)基因及蛋白表达水平。结果采用单因素方差分析。通过染毒组、治疗组及对照组的相互对比,阐明中药拮抗EEDs拟雌激素活性的作用机制。结果：(1)确定爪哇猴由EEDs引致性早熟疾病模型,应以26月龄为最佳月龄,以低剂量BPA (200mg/kg)及4-NP (50mg/kg)为最佳染毒剂量,以4周为最佳染毒时间。(2)染毒组与对照组比较雌激素水平明显升高,阴道脱落细胞成熟指数显著增加,子宫湿重、脏器系数、子宫内膜上皮细胞高度、子宫腺上皮高度显著增加,子宫内膜及肌层厚度明显增高。治疗组与染毒组相比,上述指标均显著降低(p<0.05)。(3) RT-PCR方法检测显示BPA.4-NP联合染毒可导致ERα、 ERP、EGFR、IGF-1R、CYP11A1、CYP19A1的mRNA表达水平显著上调(p<0.05)。而中药干预后,可使上述基因表达显著下调(p<0.05)。(4)经Western Blot方法验证BPA、4-NP联合染毒可导致ERα、ERβ、EGFR、CYP19A1的蛋白表达水平显著上调(p<0.05)。而中药干预后,可使上述蛋白表达显著下调(p<0.05)。结论：(1)我们成功地建立了灵长类——爪哇猴由EEDs引致的性早熟疾病模型；(2)在爪哇猴性早熟模型上验证了滋阴泻火中药对EEDs的拟雌激素活性具有显著的拮抗作用；(3)滋阴泻火中药可通过使生殖器官ER、EGFR、IGFR表达的下调以及雌激素合成关键酶的表达下调,多水平、多靶点地发挥其对EEDs拟雌激素活性及生殖毒性的拮抗作用。