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目的利用体外分离培养兔滑膜间充质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells, SMSCs),探讨其在体外多向分化潜能。为其作为组织工程的种子细胞来源提供科学依据。方法取4-6周龄的新西兰大白兔4只,雌雄不限,体重1.5-1.8kg。取兔子膝关节滑膜组织,通过消化培养法从兔滑膜组织中分离出SMSCs并加以纯化,进一步在体外培养条件下研究其形态学、超微结构、分子表型、增殖动力学等基本的生物学特性。行原代及传代培养,在光镜下观察细胞形态,在电镜下观察细胞超微结构,并用流式细胞仪和免疫组化进行细胞表面标记物的检测,MTT法测定第三代细胞的增殖情况,并绘制出生长曲线。待第3代细胞长满培养瓶后移去细胞基础培养液,分别加入特定培养液进行成骨、成脂、成软骨诱导分化。成骨诱导7天后行Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色,10d后行碱性磷酸酶(ALP)染色检测,21d后行茜素红染S染色及von-kossa染色检测；21天后通过电镜检测诱导后SMSCs的表面结构及超微结构；成脂诱导21d后行油红0染色检测；成软骨诱导21d后行甲苯胺蓝染色、免疫组织化学染色检测。取生长状态良好第三代细胞兔滑膜间充质干细胞接种到自制的异种生物衍生骨支架材料上成骨诱导体外构建组织工程骨。结果SMSCs原代培养24h后细胞形态呈细长或呈多角形；48h后细胞数量明显增多,72h-96h后可见大量纺锤形细胞,其间散在分布少许小圆形细胞。流式细胞仪检测SMSCs表面标记物CD55的表达为99.4%；免疫荧光检测SMSCs表面标记物CD90的表达阳性。第3代SMSCs的生长曲线符合干细胞的生长曲线。第三代与第七代细胞的增殖无明显差异(p>0.05)。第3代SMSCs通过透射电镜下可见SMSCs较分散,细胞间无明显连接结构,扫描电镜下见细胞呈长梭形,有两分支样突起,SMSCs细胞核呈椭圆形,单核或双核,通常有2-3个核仁。第3代SMSCs成骨诱导7天后行Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色阳性,10d后ALP染色阳性,21d时茜素红S染色呈阳性,von-kossa染色阳性,SMSCs成骨诱导21天后通过扫描电镜下见细胞成星形,胞体增大,透射电镜下见诱导后细胞连接紧密,带有大量微绒毛样突起,交错样排列,细胞器更加丰富,线粒体明显增多；成脂诱导21d后油红0染色阳性；成软骨诱导21d后甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性。SMSCs能与自制的生物衍生骨支架材料粘附并增殖,可见成骨细胞贴附,SMSCs与支架有较好的相容性。结论兔膝关节滑膜组织可分离获取SMSCs,兔SMSCs在体外诱导下具有向成软骨、成骨、成脂多向分化的潜能,SMSCs与自制的生物衍生骨支架材料有较好的相容性。有望成为组织工程理想的种子细胞来源,在骨和软骨的再生修复中发挥重要作用。