NF-κB诱捕ODN抑制异位及在位内膜分泌RANTES及趋化单核细胞的研究

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第一部分IL-1β刺激异位、在位和正常子宫内膜基质细胞分泌RANTES水平比较目的:比较子宫内膜异位症患者异位内膜、在位内膜和正常子宫内膜分泌RANTES的水平,以了解盆腔局部趋化巨噬细胞浸润的始动因素。方法:不同浓度(5、10、20 ng/ml)的IL-1β刺激培养异位内膜基质细胞;选择最佳刺激浓度(10 ng/ml)的IL-1β刺激培养异位内膜、在位内膜和正常内膜基质细胞,在不同的时间点取培养上清ELISA检测RANTES水平。结果:10ng/ml的IL-1β是刺激异位内膜基质细胞分泌RANTES的最佳浓度;异位内膜基质细胞分泌RANTES的水平显著高于在位内膜和正常内膜(P<0.01);刺激培养60小时后,在位内膜RANTES分泌量较正常内膜显著增加(P<0.05)。结论:EMS患者的在位内膜较正常内膜相比,其生物学特性已经发生了改变,盆腔内的异位内膜、巨噬细胞和细胞因子形成了一个炎症反馈环,促进了异位内膜的种植、生长和局部炎症的发生。第二部分异位、在位内膜基质细胞分泌的RANTES对单核细胞的趋化活性目的:比较子宫内膜异位症患者异位内膜、在位内膜和正常子宫内膜分泌的RANTES对单核细胞的趋化活性及RANTES对单核细胞的趋化能力大小。方法:Boyden小室趋化实验分析异位、在位内膜细胞刺激培养上清对U937细胞的趋化活性及上清液中RANTES趋化U937细胞的能力。结果:异位内膜基质细胞刺激培养上清所趋化的单核细胞中有62%是由RANTES趋化而来,而在位内膜的趋化率为55%。结论:在相似的培养条件下,EMS患者的异位和在位内膜基质细胞RANTES趋化单核细胞的能力有别于正常内膜;在内异症中局部募集的巨噬细胞中约2/3是由RANTES趋化而来。第三部分NF-κB诱捕ODNs对异位内膜基质细胞分泌RANTES及其趋化活性的影响目的:通过NF-κB诱捕ODNs抑制IL-1β所诱导的异位内膜基质细胞RANTES的分泌水平及其对单核细胞的趋化活性。方法:用10ng/ml的IL-1β分别刺激培养转染和未转染NF-κB诱捕ODNs的异位内膜基质细胞,在不同的时间点取培养上清ELISA检测RANTES水平及趋化实验分析对U937细胞趋化能力的变化情况。结果:异位内膜基质细胞在IL-1β刺激培养12小时后,诱捕ODNs转染组RANTES的分泌量较非转染组相比显著下降(p<0.05)。而非转染组在各时间点的RANTES水平均无显著差异(p>0.05);NF-κB诱捕ODNs可通过抑制IL-1β所诱导的异位内膜基质细胞分泌RANTES而减少对U937细胞的趋化活性。结论:NF-κB诱捕ODNs可通过抑制IL-1β所诱导的异位内膜基质细胞分泌RANTES而减少对单核细胞的趋化活性,有利于干扰内异症患者盆腔内炎症反馈环的进展。
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