【摘 要】
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目的:探讨番茄红素（Lyc）是否对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的内皮祖细胞（EPCs）损伤具有保护作用及其调控机制。方法:从健康志愿者外周血中分离EPCs,经体外培养表型鉴定后予以不同浓度ox-LDL诱导EPCs损伤模型,采用CCK-8检测确定ox-LDL诱导EPCs损伤的最佳浓度和时间;观察不同浓度Lyc对EPCs存活率的影响,采用CCK-8检测确定Lyc干预EPCs后细胞存活率筛选出
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目的:探讨番茄红素（Lyc）是否对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的内皮祖细胞（EPCs）损伤具有保护作用及其调控机制。方法:从健康志愿者外周血中分离EPCs,经体外培养表型鉴定后予以不同浓度ox-LDL诱导EPCs损伤模型,采用CCK-8检测确定ox-LDL诱导EPCs损伤的最佳浓度和时间;观察不同浓度Lyc对EPCs存活率的影响,采用CCK-8检测确定Lyc干预EPCs后细胞存活率筛选出Lyc干预最佳浓度和时间,方便进行后续实验。为探讨Lyc是否对ox-LDL诱导的EPCs损伤具有保护作用,将实验分为4组:对照组;Lyc组:Lyc（10μg/m L,48h）;ox-LDL组:ox-LDL（100μg/m L,48h）;ox-LDL+Lyc组:ox-LDL（100μg/m L,24h）+Lyc（10μg/m L,24h）。采用CCK-8检测细胞存活率,划痕实验和成管实验检测EPCs迁移、成管情况,WB检测细胞焦亡相关蛋白（NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18）表达情况,流式细胞术检测细胞死亡情况。为探讨Lyc保护ox-LDL诱导EPCs损伤可能作用机制,将实验分为4组:对照组;ox-LDL组:ox-LDL（100μg/m L,48h）;ox-LDL+Lyc组:ox-LDL（100μg/m L,24h）+Lyc（10μg/m L,24h）;ox-LDL+AMPK抑制剂（compound C,CC）+Lyc组:ox-LDL（100μg/m L,24h）+CC（1μg/m L,Lyc前30min）+Lyc（10μg/m L,24h）。通过CCK-8检测细胞存活率,划痕实验和成管实验检测EPCs迁移、成管情况。WB检测细胞焦亡相关蛋白（NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18）以及AMPK/m TOR信号通路相关细胞蛋白（p-AMPK/AMPK、p-m TOR/m TOR）表达情况,流式细胞术检测细胞焦亡情况。结果:番茄红素减轻ox-LDL诱导的EPCs焦亡,改善EPCs的增殖、迁移和成管功能。番茄红素的保护作用与AMPK/m TOR-NLRP3信号通路介导的焦亡密切相关。结论:番茄红素通过AMPK/m TOR-NLRP3信号通路抑制ox-LDL诱导的EPCs功能损伤。
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