Daintain/AIF-1对乳腺癌细胞MDA-MB-231,MCF-7生理功能的影响

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Daintain最初由猪小肠中分离出来,AIF-1 (allograft inflammatory factor-1, AIF-1)是从人心脏异体移植排斥反应中克隆出来的,序列比对表明二者高度一致,因此称为daintain/AIF-1。Daintain/AIF-1全长146个氨基酸,包含一个EF手性结构域,是一种钙结合蛋白和脚手架蛋白。Daintain/AIF-1分布于在多种组织,包括肝脏、神经系统、脾脏和肺脏等。该蛋白参与了免疫应答、血糖调节等生理过程和心血管疾病与自身免疫性疾病等病理过程,并与细胞增殖和迁移相关。但是肿瘤微环境中的Daintain/AIF-1对肿瘤细胞的影响未见报道。为了探索肿瘤炎症微环境中Daintain/AIF-1的生物学功能,我们制备巨噬细胞条件培养基培养乳腺癌细胞,以模拟体内的肿瘤炎症微环境,然后检测对乳腺癌细胞迁移能力的影响。此外,我们还通过转染表达载体,研究Daintain/AIF-1过表达后对乳腺细胞的直接影响,如药物敏感性的改变,细胞粘附能力的改变。本研究完成的工作主要包括以下几个方面:(1)构建了稳定表达Daintain/AIF-1的乳腺癌细胞系MDA-MB-231, MCF-7。(2)构建了siRNA干扰Daintain/AIF-1表达的巨噬细胞系U937。(3)通过巨噬细胞条件培养基刺激乳腺癌细胞,发现Daintain/AIF-1可以激活乳腺癌中的p38MAPK信号通路,上调TNF-α表达,从而促进乳腺癌细胞MDA-MB-231, MCF-7迁移。(4)乳腺癌细胞中Daintain/AIF-1表达上调后,削弱了乳腺癌细胞对抗肿瘤药物阿霉素和顺铂的药物敏感性。(5)乳腺癌细胞中Daintain/AIF-1表达上调后,上调了14-3-3ξ蛋白的表达,降低乳腺癌细胞MCF-7的细胞粘附能力。这些结果暗示着Daintain/AIF-1可能从多种途径参与了乳腺癌的病理过程。
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