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葛氏鲈塘鳢(Perccottus glenii)是一类经济型淡水鱼,也是人们常说的“老头鱼”。葛氏鲈塘鳢味道鲜美,富含多种蛋白质、微量元素和维生素。目前,葛氏鲈塘鳢研究局限于养殖技术、生活习性、抗药性等方面,而关于葛氏鲈塘鳢的提取物及生物活性的研究未见报道,本试验首次对葛氏鲈塘鳢进行了多糖的提取纯化及抗凝血活性的研究,为葛氏鲈塘鳢的综合及高值化利用提供了科学依据。其研究意义在于比较评价了葛氏鲈塘鳢多糖的提取及抗凝血活性研究,为葛氏鲈塘鳢的活性物质研究做了有益的评价。具体研究内容与结果如下:1.采用碱解法从葛氏鲈塘鳢鱼头中提取多糖,经脱脂、离心、碱解、浓缩、醇沉、冻干后得到葛氏鲈塘鳢鱼头粗多糖,得率为5.23%。2.采用动物试验的方式鉴定多糖是否具有延长血液凝固时间的活性:经毛细血管法试验得到:空白组凝血时间为64±3.14 s,高剂量试验组凝血时间为125±5.56 s;经断尾法试验得到:空白组出血时间为5.8±0.4s,,高剂量试验组出血时间为12.21±0.8s3.采用体外试验的方式鉴定多糖是否具有延长血浆凝固时间的活性:通过PUN-2048B型凝血仪进行凝血指标的测定,结果表明,葛氏鲈塘鳢粗多糖具有延长血浆凝血时间的活性。在50mg/mL时aPTT测定时间为62 s±4.1。4.葛氏鲈塘鳢粗多糖去蛋白质试验,采取了三种方法相互比较的方式进行筛选,分别为Sevage法、TAC法和酶法与Sevage法联用。其中胰蛋白酶与sevage法联用的方式去蛋白能力最佳,其蛋白清除率为80.12%,多糖损失率为30.12%。5.采取DEAE-52纤维素柱层析的方式对葛氏鲈塘鳢粗多糖(PGP)进行分离,分离得到三个主要多糖组分,PGP-1、PGP-2和PGP-3得率分别为432.1 mg/g、291.6mg/g和172.2 mg/g;在4mg/mL浓度下,PGP-1和PGP-2多糖组分均有较好的抗凝血效果,aPTT测试时间分别为64±2.3 s和57±2.6 s,其中PGP-3无明显抗凝血效果。6.采取G-100葡聚糖凝胶柱层析的方式对PGP-1多糖组分进行纯化,得到了三种纯化后的多糖组分。分别为P-1、P-2、P-3;总糖含量分别为65.1%、63.53%、66.43%;总蛋白含量分别为1.64%、1.76%、2.2%;在4mg/mL浓度下,P-2和P-3多糖组分均有较好的抗凝血效果,aPTT测试时间分别为72±5.7 s和65±4.1 s,其中P-1多糖组分无明显抗凝效果。7.采取紫外光谱和傅里叶红外变换光谱分析,葛氏鲈塘鳢多糖组分P-1、P-2、P-3均有多糖类物质的特征吸收峰,并且发现P-1组分是与蛋白质结合的多糖。8.采用高效液相法对葛氏鲈塘鳢P-1多糖组分进行单糖组成分析。样品通过与单糖标准品进行比对分析,得出葛氏鲈塘鳢P-1多糖组分是由鼠李糖、糖醛酸、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖组成,根据内标法计算得到,其单糖组成摩尔比为:0.64:24.6:17.15:21.49:35.12。