甲基丙二酸血症（methymalonic acidemia，MMA）是一种常染色体隐性遗传病，主要是由于甲基丙二酰辅酶A变位酶(Methylmalonyl-CoA mutase，MCM)自身缺陷或其辅酶钴胺素(Cobalamin，cbl，VitB12)代谢缺陷，导致甲基丙二酸、3-羟基丙酸及甲基枸橼酸等代谢物异常蓄积[1]。MMA临床表现多样化，最常见的症状和体征是反复呕吐、嗜睡、惊厥、肌张力低下及运动智力发育落后。根据酶缺陷类型分为MCM缺陷（Mut型）及其辅酶钴胺素代谢障碍两大类。MCM完全无活性者为mut0型，有残余活性者为mut-型，编码基因为MUT。辅酶钴胺素代谢障碍包括cblA、cblB、cblC、cblD、cblF和cblH。其中cblA、cblB、cblC、cblD和cblF相应编码基因分别为MMAA、MMAB、MMACHC、MMADHC及LMBRD1。Mut0、mut-、cblA、cblB和cblH仅表现为MMA，故称为单纯MMA，而cblC、cblD和cblF则导致腺苷钴胺素和甲基钴胺素合成缺陷，血同型半胱氨酸增高，故称为MMA合并同型半胱氨酸血症。 目的： 本研究目的在于检测中国MMA患儿的基因突变类型及突变频率，分析患儿临床资料，探讨突变基因型与临床表型之间的关系，为有需求的MMA患者家庭提供基因诊断、产前诊断及高危携带者诊断服务。 对象： 对2003年01月～2009年02月收集的71例MMA患儿进行基因研究。其中34例经本院小儿内分泌、遗传代谢病研究室诊断，临床资料相对齐全，故对其进行临床诊治分析。34例患儿经北京大学第一医院儿科确诊，3例经广州儿童医院确诊。所有患儿父母系非近亲婚配，所有检查均获得患儿家长或监护人的知情同意。 方法： 1. MMA诊断及分型：（1）根据串联质谱检测患儿血中丙酰肉碱(propionylcarnitine，C3)、C3与游离肉碱(free carnitine，C0)比值和C3与乙酰肉碱(acetylcarnitine,C2)比值；气相色谱-质谱检测尿甲基丙二酸水平进行诊断。（2）对确诊患者依据血清同型半胱氨酸水平，分为单纯MMA和MMA合并同型半胱氨酸血症。（3）依据VitB12负荷试验结果分为VitB12有效型和无效型。 2. 基因突变分析：通过聚合酶链式反应(PCR)及直接测序法，进行基因突变检测；利用PCR-直接测序法和限制性片断长度多态性方法进行未报道突变鉴定。 3. 临床资料分析：整理汇总MMA患儿临床资料，利用SSPS 17.0 统计软件分析患儿基因突变类型与临床表现型之间的关系。 结果： 1. 在71例MMA患儿中，50例为MMA合并同型半胱氨酸血症，21例为单纯MMA；55例为VitB12有效型，16例为无效型。血中C3、C3/C0与C3/C2显著升高，尿中甲基丙二酸显著增高、3-羟基丙酸和甲基枸橼酸轻度增高。 2. 在MMA合并同型半胱氨酸血症50例患儿中46例检测到MMACHC基因突变，突变检出率为90％。共检测出17种突变，其中9种尚未报道突变，突变集中在外显子3和4上(93.3％)，突变类型以无义突变为主(57％)。609G>A(W203X) 突变最常见，突变频率为51％。 3. 在单纯MMA 21例患儿中16例检测出MUT基因突变。共检测到19种突变，其中9种为尚未报道突变，突变集中在外显子2和3上(50％)，突变类型以错义突变为主(63.2％)。 4. MMA合并同型半胱氨酸血症患儿均为VitB12有效型。单纯MMA患儿中，5例为VitB12有效型，其中4例为MUT；11例为无效型，其中10例为MUT型。 结论： 1. 中国MMA患儿中以MMA合并同型半胱氨酸血症最常见(50/71)，单纯MMA较少见(21/71)。 2. MMA合并同型半胱氨酸血症患者中cblC型多见(46/50)，且存在609G>A(W203X)热点突变(51％)；单纯MMA患者中Mut型多见。 3. cblC型患儿609G>A突变者发病较早，较迟发型患儿病情严重；Mut型患儿基因型与临床表型的严重程度无显著相关性。cblC型比Mut型治疗预后好。 4. MMA合并同型半胱氨酸血症及VitB12有效型MMA患者多为MMACHC基因突变；单纯MMA及VitB12无效型MMA患者多为MUT基因突变，故可根据是否合并同型半胱氨酸血症及VitB12有效性，首先选择MMACHC或MUT基因进行突变检测，以节省时间和费用。