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目的探讨醌型二氢生物喋呤还原酶(Quinoid dihydropteridine reductase,QDPR)基因改变对高糖环境下肾小管上皮细胞系NRK-52E葡萄糖调节蛋白75(Glucoseregulated protein 75,GRP75)的影响及其在糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)中的可能作用机制。方法Western blot检测糖尿病大鼠OLETF及其对照鼠LETO肾皮质内GRP75蛋白的表达情况;利用慢病毒技术构建过表达及低表达QDPR基因及其对照的NRK-52E模型,分别于正常糖(5.4mmol/L)和高糖(30mmol/L)环境下培养72h,并分组如下:1 NRK-52E对照组(NC组)2 NRK-52E对照高糖组(NHG组)3空载过表达病毒对照组(LV-OCON组)4空载过表达病毒对照高糖组(LV-OCONHG组)5 QDPR基因过表达组(LV-QDPR组)6 QDPR基因过表达高糖组(LVQDPR-HG组)7敲低随机序列对照组(LV-SHCON组)8敲低随机序列对照高糖组(LV-SHCON-HG组)9敲低QDPR基因组(LV-SHQDPR组)10敲低QDPR基因高糖组(LV-SHQDPR-HG组)。用Western blot检测GRP75蛋白在细胞模型各组的表达水平,Propidium Iodide(PI)单染法检测细胞周期。结果1 OLETF大鼠肾皮质内GRP75蛋白含量明显低于对照组[(1.53±0.29)vs(0.79±0.28),P<0.01],差异有统计学意义;2与NRK-52E对照NC组相比,NRK-52E对照高糖NHG组的GRP75蛋白含量降低[(0.62±0.04)vs(0.46±0.07),P<0.05];3与NRK-52E对照NC组相比,NRK-52E对照高糖NHG组的G0/G1期细胞增多[(39.80±1.61)%vs(50.35±0.40)%,P<0.01],S期细胞减少[(48.55±2.27)%vs(37.17±0.12)%,P<0.05];4成功构建了过表达QDPR基因的NRK-52E细胞模型;5成功构建了敲低QDPR基因的NRK-52E细胞模型;6正常糖环境下,QDPR基因过表达LV-QDPR组的GRP75蛋白表达含量较空载过表达LVOCON组无明显变化(P>0.05);与QDPR基因过表达LV-QDPR组及空载过表达病毒对照高糖LV-OCON-HG组相比,QDPR基因过表达高糖LV-QDPR-HG组的GRP75蛋白含量降低[(0.95±0.10)、(0.85±0.13)vs(0.45±0.20),P<0.05];7与空载过表达病毒对照高糖LV-OCON-HG组相比,QDPR基因过表达高糖LVQDPR-HG组的G0/G1期细胞增多[(43.73±0.59)%vs(61.87±0.21)%,P<0.01],S期细胞减少[(42.42±0.81)%vs(25.29±0.14)%,P<0.01];8与敲低随机序列对照高糖LV-SHCON-HG组相比,敲低QDPR基因高糖LV-SHQDPR-HG组的GRP75表达量[(1.06±0.05)vs(1.00±0.11),P>0.05]无明显变化;9与敲低随机序列对照高糖LV-SHCON-HG组相比,敲低QDPR基因高糖LV-SHQDPR-HG组的G2/M期细胞增多[(13.86±0.87)%vs(16.69±0.50)%,P<0.01]、S期细胞减少[(42.78±1.46)%vs(38.59±0.16)%,P<0.01],但G0/G1期细胞无明显变化[(43.36±1.19)%vs(44.71±0.48)%,P>0.05]。结论1 GRP75蛋白在DN模型中表达含量减少,提示GRP75参与了DN的发病;2高糖环境下过表达NRK-52E细胞内QDPR基因能下调GRP75表达,诱导细胞周期阻滞,提示QDPR可能通过GRP75影响细胞周期进而影响DN的发生、发展。